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慢病毒介导强制泛素化HBcAg基因修饰小鼠髓源性树突状细胞体外诱导细胞毒性T淋巴细胞反应

发布时间:2021-08-03 12:26
  乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)的慢性感染仍然危害人类健康,全球大约有3.5亿人感染HBV,部分患者最终进展为肝硬化、肝细胞癌。目前尚无有效的方法彻底清除患者体内的乙肝病毒。特异性的细胞免疫反应在控制HBV的感染中起关键性作用,通过抗原刺激产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes, CTL)是清除慢性HBV感染者体内病毒的一个有效途径。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)是一种广泛存在于真核细胞内依赖ATP的高选择性蛋白质降解体系,它由泛素(ubiquitin, Ub)、泛素活化酶(ubiquitin-activating enzyme, E1)、泛素结合酶(ubiquitin-conjugating enzyme, E2)、泛素-蛋白连接酶(ubiquitin-protein ligase, E3)、26S蛋白酶体及去泛素化酶(deubiquitinating enzyme, DUB)等组成。泛素化的蛋白被蛋白酶体复合物识别后降解为若干小肽段,可以与MHCⅠ类分子结合被抗... 

【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

慢病毒介导强制泛素化HBcAg基因修饰小鼠髓源性树突状细胞体外诱导细胞毒性T淋巴细胞反应


慢病毒载体图谱

示意图,示意图,基因,实验设计


19图 1-2 慢病毒载体构建示意图Fig1-2 Schematic diagram of pWPXLd vector.3.2 Ub-HBcAg 基因及 HBcAg 基因的 PCR 扩增PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳分离,结果在 780bp 附近可见清晰的扩增带,与实验设计的 Ub-HBcAg 基因的长度相符,对照组扩增的 HBcAg 基因在 550bp 左右出现条带见图 1-3。

PCR扩增,测序,基因,酶切鉴定


3 Ub-HBcAg 及 HBcAg 对照基因片段 PCR 扩增HBcAg 基因; 2.HBcAg 基因; M.DNA markElectrophoresis of PCR for Ub-HBcAg and HBcAb-HBcAg gene; 2. HBcAg gene; M.DNA marker 粒 pW-Ub-HBcAg 的酶切鉴定 BamHⅠ和 MluⅠ双酶切鉴定重组质粒b-HBcAg 双酶切后释放出大小约 780bp 的送上海生工测序鉴定,测序结果显示 U

【参考文献】:
期刊论文
[1]Targeting hepatitis B virus antigens to dendritic cells by heat shock protein to improve DNA vaccine potency[J]. Qin-Long Gu, Bing-Ya Liu, Department of Surgery, Shanghai Institute of Digestive Surgery, Affiliated Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200025, China Xue Huang, Wen-Hong Ren, Lei Shen, Si-Yi Chen, Center for Cell and Gene Therapy, Department of Molecular and Human Genetics, Baylor College of Medicine, Houston, Texas 77030, United States.  World Journal of Gastroenterology. 2007(44)
[2]The Ubiquitin-Proteasome System and Its Role in Inflammatory and Autoimmune Diseases[J]. Michael A.Maldonado.  Cellular & Molecular Immunology. 2006(04)
[3]Immune therapy including dendritic cell based therapy in chronic hepatitis B virus infection[J]. Sk Md Fazle Akbar,Norio Horiike,Morikazu Onji.  World Journal of Gastroenterology. 2006(18)



本文编号:3319618

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