细胞焦亡在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用研究
发布时间：2021-08-21 11:57
目的:通过建立小鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）模型并检测细胞焦亡和炎症相关指标的表达情况,探索细胞焦亡是否参与了小鼠HIRI的发生发展过程。方法:（1）建立70%小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型:SPF级C57BL/6雄性小鼠24只,810周龄,体重1822 g,随机分为假手术对照组（Sham组,n=6）、再灌注6 h组（HIR 6 h组,n=6）、再灌注12h组（HIR 12 h组,n=6）、再灌注24 h组（HIR 24 h组,n=6）。使用“结扎法”结扎肝中叶和肝左叶的共干（显微手术器械和8-0丝线结扎肝中叶和肝左叶的共干）,阻断两肝叶血流90 min后再开放,分别于上述各时间点处死小鼠采集血液和肝脏组织标本;（2）血液标本提取血清后使用全自动生化仪检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）以及乳酸脱氢酶（LDH）的表达水平,选择肝功能损伤最严重的一组实验小鼠继续进行后续研究;（3）HE染色观察假手术对照组和所选实验组肝脏组织病理变化;（4）实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测两组肝组织中细胞焦亡和炎症相关mRNA表达情况;（5）蛋白...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠HIRI模型建立情况
灌注后 12 h 后达到高峰，分别为（11529.6±1871.9）U/L、（13188.0±3209.1）U/L 和（34502.1±7939.6）U/L，与对照组相比较，差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。随着时间的推移，各项指标逐渐下降。上述结果表明，在小鼠缺血再灌注 12 h 后，肝组织受损最严重，随后肝功能渐渐恢复。因此，在后续的实验中选择 HIR 12 h 组继续进行研究。如表 3-1 和图 3-2。表 3-1 血清 ALT、AST 及 LDH 表达水平组别 ALT（U/L） AST（U/L） LDH（U/L）Sham 组 44.0±12.5 147.0±8.7 523.7±56.4HIR 6 h 组 368.7±129.4* 615.6±57.0* 2324.1±316.3*HIR 12 h 组 11529.6±1871.9* 13188.0±3209.1* 34502.1±7939.6*HIR 24 h 组 2217.3±713.6* 1365.0±433.8* 1850.0±356.8*注：*表示与 Sham 组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。
HE×40 HE×100 HE×400图 3-3 Sham 组肝组织病理学改变HE×40 HE×100 HE×400图 3-4 HIR 12 h 组肝组织病理学改变3.4 细胞焦亡和炎症相关基因表达情况为了研究小鼠 HIRI 后肝脏组织细胞焦亡和炎症相关基因的表达情况，本研究提取了 Sham 组和 HIR 12 h 组小鼠肝组织总 RNA，借助实时荧光定量 PCR 技
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞焦亡激活机制及相关疾病研究进展[J]. 祁会丽,姚丽芬. 中华实用诊断与治疗杂志. 2016(05)
[2]AIM2炎症小体在感受细胞浆DNA中的作用[J]. 宋启斌,褚玉新,胡伟国. 中国免疫学杂志. 2015(03)
[3]MCP-1在炎性反应中的研究进展[J]. 毛志敏,周如丹,赵学凌,王兵. 医学综述. 2013(06)
[4]肝缺血再灌注损伤的机制及其预防[J]. 何剑戈,任爱红,施懿诚,侯小漫,赵义鸽. 河南科技大学学报(医学版). 2012(03)
[5]CXCR1、CXCR2及其配体的结构和功能[J]. 毕惠娟,王健. 免疫学杂志. 2010(12)
[6]肝脏缺血再灌注损伤的发生机制研究进展[J]. 王冰,汪根树,陈规划. 器官移植. 2010(05)
[7]白介素-1β介导缺血再灌注损伤后肺损伤[J]. 毕宁康,岳屹囡,蒋红雨,张力. 中华妇幼临床医学杂志. 2009(01)
[8]褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 甄允方,孙庆林,顾志成,汪健. 苏州大学学报(医学版). 2007(01)
[9]凋亡相关斑点样蛋白ASC的研究进展[J]. 胡艳玲,刘佳佳. 国际免疫学杂志. 2008 (03)
[10]小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型的建立[J]. 麻勇,汪大伟,刘连新,王建奇,王继洲,潘华洋,潘尚哈,姜洪池. 中华消化外科杂志. 2013 (09)
博士论文
[1]NALP3炎症小体参与小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制[D]. 朱平.华中科技大学 2011
硕士论文
[1]肝缺血再灌注损伤中奥曲肽对HMGB1、CHOP、caspase11的影响[D]. 肖卫强.南华大学 2017
本文编号：3355554
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠HIRI模型建立情况
灌注后 12 h 后达到高峰，分别为（11529.6±1871.9）U/L、（13188.0±3209.1）U/L 和（34502.1±7939.6）U/L，与对照组相比较，差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。随着时间的推移，各项指标逐渐下降。上述结果表明，在小鼠缺血再灌注 12 h 后，肝组织受损最严重，随后肝功能渐渐恢复。因此，在后续的实验中选择 HIR 12 h 组继续进行研究。如表 3-1 和图 3-2。表 3-1 血清 ALT、AST 及 LDH 表达水平组别 ALT（U/L） AST（U/L） LDH（U/L）Sham 组 44.0±12.5 147.0±8.7 523.7±56.4HIR 6 h 组 368.7±129.4* 615.6±57.0* 2324.1±316.3*HIR 12 h 组 11529.6±1871.9* 13188.0±3209.1* 34502.1±7939.6*HIR 24 h 组 2217.3±713.6* 1365.0±433.8* 1850.0±356.8*注：*表示与 Sham 组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。
HE×40 HE×100 HE×400图 3-3 Sham 组肝组织病理学改变HE×40 HE×100 HE×400图 3-4 HIR 12 h 组肝组织病理学改变3.4 细胞焦亡和炎症相关基因表达情况为了研究小鼠 HIRI 后肝脏组织细胞焦亡和炎症相关基因的表达情况，本研究提取了 Sham 组和 HIR 12 h 组小鼠肝组织总 RNA，借助实时荧光定量 PCR 技
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞焦亡激活机制及相关疾病研究进展[J]. 祁会丽,姚丽芬. 中华实用诊断与治疗杂志. 2016(05)
[2]AIM2炎症小体在感受细胞浆DNA中的作用[J]. 宋启斌,褚玉新,胡伟国. 中国免疫学杂志. 2015(03)
[3]MCP-1在炎性反应中的研究进展[J]. 毛志敏,周如丹,赵学凌,王兵. 医学综述. 2013(06)
[4]肝缺血再灌注损伤的机制及其预防[J]. 何剑戈,任爱红,施懿诚,侯小漫,赵义鸽. 河南科技大学学报(医学版). 2012(03)
[5]CXCR1、CXCR2及其配体的结构和功能[J]. 毕惠娟,王健. 免疫学杂志. 2010(12)
[6]肝脏缺血再灌注损伤的发生机制研究进展[J]. 王冰,汪根树,陈规划. 器官移植. 2010(05)
[7]白介素-1β介导缺血再灌注损伤后肺损伤[J]. 毕宁康,岳屹囡,蒋红雨,张力. 中华妇幼临床医学杂志. 2009(01)
[8]褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 甄允方,孙庆林,顾志成,汪健. 苏州大学学报(医学版). 2007(01)
[9]凋亡相关斑点样蛋白ASC的研究进展[J]. 胡艳玲,刘佳佳. 国际免疫学杂志. 2008 (03)
[10]小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型的建立[J]. 麻勇,汪大伟,刘连新,王建奇,王继洲,潘华洋,潘尚哈,姜洪池. 中华消化外科杂志. 2013 (09)
博士论文
[1]NALP3炎症小体参与小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制[D]. 朱平.华中科技大学 2011
硕士论文
[1]肝缺血再灌注损伤中奥曲肽对HMGB1、CHOP、caspase11的影响[D]. 肖卫强.南华大学 2017
本文编号：3355554
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3355554.html
最近更新
教材专著
