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树鼩、小鼠HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究

发布时间:2021-08-24 19:08
  肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在肝癌病因学方面,目前倾向于多因素、多步骤发生且多个因素间交互作用的观点。乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是肝癌最重要的病因之一,在发展中国家尤为突出。全世界大约有53%,我国约90%的HCC病例与HBV相关。近来的研究表明乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带者发生HCC的机率是非感染者的25~37倍。因此,研究HBV的感染和致癌机理无疑有着重要的意义。但因缺乏体外的增殖系统和易获得的动物模型、细胞模型,HBV感染肝脏的早期机理研究进展较为缓慢,从而在一定程度上影响乙型肝炎及其相关肝病的研究。本研究尝试用睾丸介导基因转移法(TMGT),构建转HBx、ras基因树鼩和小鼠,为从整体水平研究HBV感染诱发肝癌作用的机制提供理想的动物模型。另一方面,选用树鼩作为原代肝细胞的供体,成功构建了HBV感染树鼩肝细胞的体外模型,并在此基础上初步探讨了HBx在HBV感染中的作用及抗病毒药物干扰素-a的作用靶点。第一部分HBx基因的克隆和序列分析及其真核表达载体的构建目的通过HB... 

【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】:165 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

树鼩、小鼠HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究


HBx测序峰图(ChromaS2.3)显示基因全长465bp3.HBx基因(A、B、C和D野生型)与新克隆的HBx基因进化树分析

酶切图,酶切图,片段


文树的体内HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究其中3个克隆被切开,可见54O0bp的质粒片段和约490bp(含酶切位Kozak序列)的HBx基因片段,如图5,说明目的片段已正确插入到载体中,从而构建了pcDNA3.1(+)一HBx重组质粒。用软件VectorNTI质粒图,如图6。Marker

酶切图,酶切图,质粒


peDNA3.l(+)一HBX质粒图

【参考文献】:
期刊论文
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[10]c-Ha-ras转基因小鼠的构建与鉴定[J]. 奚涛,王玲玲,成国祥.  药物生物技术. 2001(06)



本文编号:3360555

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