树鼩、小鼠HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究
发布时间:2021-08-24 19:08
肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在肝癌病因学方面,目前倾向于多因素、多步骤发生且多个因素间交互作用的观点。乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是肝癌最重要的病因之一,在发展中国家尤为突出。全世界大约有53%,我国约90%的HCC病例与HBV相关。近来的研究表明乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带者发生HCC的机率是非感染者的25~37倍。因此,研究HBV的感染和致癌机理无疑有着重要的意义。但因缺乏体外的增殖系统和易获得的动物模型、细胞模型,HBV感染肝脏的早期机理研究进展较为缓慢,从而在一定程度上影响乙型肝炎及其相关肝病的研究。本研究尝试用睾丸介导基因转移法(TMGT),构建转HBx、ras基因树鼩和小鼠,为从整体水平研究HBV感染诱发肝癌作用的机制提供理想的动物模型。另一方面,选用树鼩作为原代肝细胞的供体,成功构建了HBV感染树鼩肝细胞的体外模型,并在此基础上初步探讨了HBx在HBV感染中的作用及抗病毒药物干扰素-a的作用靶点。第一部分HBx基因的克隆和序列分析及其真核表达载体的构建目的通过HB...
【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】:165 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
HBx测序峰图(ChromaS2.3)显示基因全长465bp3.HBx基因(A、B、C和D野生型)与新克隆的HBx基因进化树分析
文树的体内HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究其中3个克隆被切开,可见54O0bp的质粒片段和约490bp(含酶切位Kozak序列)的HBx基因片段,如图5,说明目的片段已正确插入到载体中,从而构建了pcDNA3.1(+)一HBx重组质粒。用软件VectorNTI质粒图,如图6。Marker
peDNA3.l(+)一HBX质粒图
【参考文献】:
期刊论文
[1]采用Percoll法分离、纯化鲫肝细胞[J]. 张高峰,郭彤,魏华,马珂. 中国水产科学. 2007(02)
[2]肝癌治疗进展和展望[J]. 芮静安. 临床肝胆病杂志. 2004(03)
[3]树鼩卵母细胞的体外成熟培养及体外受精[J]. 岳惠芬,苏建家,李瑗,黄右军,杨春,班克臣,欧超,曹骥,段小娴,翟丹梅. 黑龙江动物繁殖. 2004(01)
[4]Ras信号转导通路[J]. 何太平,严卫红. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 2004(01)
[5]显微注射法和精原干细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的方法学比较[J]. 李丹,胡火珍,李小玉,钟立武,胡以平. 四川大学学报(医学版). 2003(04)
[6]分离肝细胞纯化培养方法的比较研究[J]. 刘俊,王英杰,王宇明,刘国栋,谭朝霞,刘鸿凌,于乐成. 消化外科. 2003(05)
[7]p16影响乙肝病毒相关性肝细胞肝癌的发生[J]. 王兆文,彭志海,李克,裘国强,张益,顾炜. 中华肿瘤杂志. 2003(04)
[8]树鼩实验性肝癌发生过程p53基因的变化[J]. 苏建家,李瑗,班克臣,覃柳亮,王辉云,杨春,欧超,段小娴,李永翊,严瑞琪. 中华肝脏病杂志. 2003(03)
[9]乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学观察[J]. 康爱君,董宇红,田枫,郑杰,王美华,郭长占,周淑佩,王兆绰,席宏丽,曾争. 中国实验动物学杂志. 2002(01)
[10]c-Ha-ras转基因小鼠的构建与鉴定[J]. 奚涛,王玲玲,成国祥. 药物生物技术. 2001(06)
本文编号:3360555
【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】:165 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
HBx测序峰图(ChromaS2.3)显示基因全长465bp3.HBx基因(A、B、C和D野生型)与新克隆的HBx基因进化树分析
文树的体内HBx、ras转基因模型及体外HBV感染模型的研究其中3个克隆被切开,可见54O0bp的质粒片段和约490bp(含酶切位Kozak序列)的HBx基因片段,如图5,说明目的片段已正确插入到载体中,从而构建了pcDNA3.1(+)一HBx重组质粒。用软件VectorNTI质粒图,如图6。Marker
peDNA3.l(+)一HBX质粒图
【参考文献】:
期刊论文
[1]采用Percoll法分离、纯化鲫肝细胞[J]. 张高峰,郭彤,魏华,马珂. 中国水产科学. 2007(02)
[2]肝癌治疗进展和展望[J]. 芮静安. 临床肝胆病杂志. 2004(03)
[3]树鼩卵母细胞的体外成熟培养及体外受精[J]. 岳惠芬,苏建家,李瑗,黄右军,杨春,班克臣,欧超,曹骥,段小娴,翟丹梅. 黑龙江动物繁殖. 2004(01)
[4]Ras信号转导通路[J]. 何太平,严卫红. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 2004(01)
[5]显微注射法和精原干细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的方法学比较[J]. 李丹,胡火珍,李小玉,钟立武,胡以平. 四川大学学报(医学版). 2003(04)
[6]分离肝细胞纯化培养方法的比较研究[J]. 刘俊,王英杰,王宇明,刘国栋,谭朝霞,刘鸿凌,于乐成. 消化外科. 2003(05)
[7]p16影响乙肝病毒相关性肝细胞肝癌的发生[J]. 王兆文,彭志海,李克,裘国强,张益,顾炜. 中华肿瘤杂志. 2003(04)
[8]树鼩实验性肝癌发生过程p53基因的变化[J]. 苏建家,李瑗,班克臣,覃柳亮,王辉云,杨春,欧超,段小娴,李永翊,严瑞琪. 中华肝脏病杂志. 2003(03)
[9]乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学观察[J]. 康爱君,董宇红,田枫,郑杰,王美华,郭长占,周淑佩,王兆绰,席宏丽,曾争. 中国实验动物学杂志. 2002(01)
[10]c-Ha-ras转基因小鼠的构建与鉴定[J]. 奚涛,王玲玲,成国祥. 药物生物技术. 2001(06)
本文编号:3360555
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