CCM蛋白对肠上皮稳态的作用研究

发布时间：2021-08-26 01:55

　　肠道稳态是肠黏膜屏障、肠道内环境等相互作用所构成的动态平衡状态。肠粘膜包括机械屏障即肠黏膜上皮结构,包括了肠上皮细胞及肠上皮细胞间的连接等,具有吸收营养物质并将有害物质排除在屏障外的功能。肠粘膜受损时,伤口附近的肠上皮细胞会丧失极性,细胞表面的微绒毛也会消失,从而使屏障功能受损,内毒素和细菌容易侵入。为了修复肠粘膜,损伤周围的肠上皮细胞会迅速迁移,隐窝基底部的干细胞也会发生增殖分化对肠粘膜进行修复。大脑海绵状血管瘤（CCM）是一种以扩张微血管为主要特征的中枢神经系统疾病,CCM疾病相关的蛋白（KRIT1,CCM2,PDCD10）已经证明在内皮细胞及其外膜细胞连接和屏障功能有一定影响,三种蛋白的缺失都会破坏内皮细胞的功能。但CCM蛋白在上皮屏障功能中的作用尚不明确,因此,我们拟通过CCM基因敲除小鼠探讨CCM在肠上皮稳态中的作用和机制。方法:CCM基因敲除小鼠及对照组小鼠给予腹腔注射它莫昔芬（TAM）控制CCM蛋白特异性表达,连续注射两周,通过体重百分比、疾病活动度、结肠缩短程度、组织病理学等方面评估结肠粘膜损伤程度;HE和PAS染色观察肠上皮细胞形态;免疫荧光法检测钙粘蛋白等在上皮组织... 

【文章来源】：武汉科技大学湖北省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1 PDCD10全身敲除小鼠基本情况

肠粘膜损伤时,上皮细胞极性也会发生变化。E-cadherin一般分布在细胞之间,在细胞基底分布较少。但我们通过染色,可以看到相对于对照组,肠上皮PDCD10敲除组的E-cadherin蛋白分布从均匀分布变成了极性分布,聚集在基部一侧。(如图3.4 A所示)HE染色和PAS染色,观察肠上皮细胞形态,两个绒毛之间形成桥状结构,可以看出肠绒毛细胞发生融合现象,也对肠上皮细胞极性有所影响。(如图3.4 B所示)3.5 PDCD10肠上皮特异性敲除与肠上皮细胞的迁移和分化

Ezrin(埃兹蛋白)和pNHE3是两种肠上皮顶模上部的标记物,染色结果可见表达均主要分布在肠隐窝上部,并且表达比对照组明显增多,即细胞向上发生了迁移。这些结果都提示PDCD10可以对肠上皮细胞的迁移和分化产生影响。3.6肠上皮细胞的增殖和凋亡


本文编号：3363310