幽门螺杆菌对原代培养人胃粘膜细胞胃蛋白酶原蛋白表达的影响
发布时间：2021-09-18 23:44
前言幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因,并且与胃癌的发生关系密切,但是H.pylori的致病机制尚不清楚。胃蛋白酶原（pepsinogen,PG）是胃粘膜特异性功能酶-胃蛋白酶的前体,主要来源于胃体底腺的主细胞,可分为胃蛋白酶原A（pepsinogen A,PGA）和胃蛋白酶原C（pepsinogen C,PGC）两个生物学特性和免疫学特性不同的亚型。胃粘膜分泌的PG99%进入胃腔,1%进入血循环。血清PG水平可反映不同部位胃粘膜的形态和功能。关于H.pylori与血清PG关系的研究目前集中于体内研究,这些研究结果可能受到H.pylori定植部位、PG亚型来源细胞分布差异、免疫反应以及更加复杂的机体调控系统的影响。那么H.pylori对体外培养的人胃粘膜细胞PG蛋白表达的影响究竟如何?未见文献报道。PGC基因在第7-8外显子间的内含子序列存在100bp的插入-缺失片段长度多态,研究表明PGC基因多态与胃溃疡、胃癌有关,并与H.pylori在这些疾病的发生上具有交互作用,但其确切机制尚不清楚。那么H.pylori对不同P...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：43 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
一A，胃粘膜上皮细胞接种第2天图1一C，胃粘膜上皮细胞接种第4天(40x)(40x)
从谖柑宓椎闹飨赴??虼吮臼笛檠∪「缓?飨赴?奈柑?底部正常胃粘膜进行分离培养。PGC蛋白在胃粘膜细胞中表达部位在胞浆和/或胞膜，证实了主细胞的存在，间接证实了所培养细胞为胃上皮来源(图2)勺令.产l-，’卜r.一.叮.，少﹄J、。:习、…‘分…﹄、，﹃恤诱、冬卜.﹂夕」夕产沪尸华;(︸，‘‘、.图2，原代培养胃粘膜上皮细胞PGC抗体阳性表达(200x)注:箭头所指为PGC抗体阳性表达的细胞二、且刃tori对原代培养的人胃粘膜细胞损伤作用的观察(一)形态学观察:倒置显微镜观察:正常胃粘膜上皮细胞为单层贴壁生长，呈菱形或多边形，核大呈卵圆形(图3一A)，随着共培养时间的延长细胞间隙扩大，连接松弛，细胞表面肿胀、不规则
各实验组细胞培养上清LDH活力由以上两种细胞表型特征的检测，确定采用万刃勿ri菌落数:细胞数=100例，万刃勿ri与细胞共作用6h已造成胃粘膜细胞损伤。后续实验据此设立时不加菌组(6h)、6小时加菌组(6，h)。、尽刃勿ri对原代培养的人胃粘膜细胞PG蛋白表达的影响加菌组胃粘膜细胞PGA蛋白表达(247.肚104.5u留lL)高于对39.升lo7.sug/比，p=0.90)，pGC蛋白表达(43.肚53.3ug/IL)高于对.2士23.6ug/IL，P=0.56)(图5)。各组间差异无统计学意义。表1，加菌组及对照组的PG蛋白表达(u留几)PG分组例数均数士标准差pPGA247.0士104.5239.7士107.80.90000只一︸006’6h6h’h6h
【参考文献】：
期刊论文
[1]Serum pepsinogen levels and their influencing factors:A population-based study in 6990 Chinese from North China[J]. Li-Ping Sun, Yue-Hua Gong, Lan Wang, Yuan Yuan Cancer Institute, First Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110001, Liaoning Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(48)
[2]Female hepatology:Favorable role of estrogen in chronic liver disease with hepatitis B virus infection[J]. Ichiro Shimizu,Nao Kohno,Katsuyoshi Tamaki,Masayuki Shono. World Journal of Gastroenterology. 2007(32)
[3]幽门螺杆菌CagA+菌株对BGC-823细胞系Cx43表达及细胞增殖的影响[J]. 徐灿霞,齐艳美,杨文斌,王芬,周建党,沈守荣. 中南大学学报(医学版). 2007(02)
[4]一种简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法[J]. 程永波,房殿春,郭立萍,王自强,罗元辉,周建嫦. 胃肠病学. 2007(01)
[5]胃蛋白酶原C基因插入-缺失多态与胃癌患者及其癌前疾病易感性的关系[J]. 孙丽萍,郭晓临,张晔,陈威,白雪蕾,刘瑾,袁媛. 中华医学杂志. 2006(43)
[6]幽门螺杆菌相关性胃疾病胃蛋白酶原C的表达研究[J]. 宁佩芳,刘惠杰,袁媛. 世界华人消化杂志. 2004(05)
[7]Association between pepsinogen C gene polymorphism and genetic predisposition to gastric cancer[J]. Hui-Jie Liu Xiao-Lin Guo Ming Dong Lan Wang Yuan Yuan Cancer Institute,First Affiliated Hospital,China Medical University,Shenyang,110001,Liaoning Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2003(01)
本文编号：3400562
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：43 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
一A，胃粘膜上皮细胞接种第2天图1一C，胃粘膜上皮细胞接种第4天(40x)(40x)
从谖柑宓椎闹飨赴??虼吮臼笛檠∪「缓?飨赴?奈柑?底部正常胃粘膜进行分离培养。PGC蛋白在胃粘膜细胞中表达部位在胞浆和/或胞膜，证实了主细胞的存在，间接证实了所培养细胞为胃上皮来源(图2)勺令.产l-，’卜r.一.叮.，少﹄J、。:习、…‘分…﹄、，﹃恤诱、冬卜.﹂夕」夕产沪尸华;(︸，‘‘、.图2，原代培养胃粘膜上皮细胞PGC抗体阳性表达(200x)注:箭头所指为PGC抗体阳性表达的细胞二、且刃tori对原代培养的人胃粘膜细胞损伤作用的观察(一)形态学观察:倒置显微镜观察:正常胃粘膜上皮细胞为单层贴壁生长，呈菱形或多边形，核大呈卵圆形(图3一A)，随着共培养时间的延长细胞间隙扩大，连接松弛，细胞表面肿胀、不规则
各实验组细胞培养上清LDH活力由以上两种细胞表型特征的检测，确定采用万刃勿ri菌落数:细胞数=100例，万刃勿ri与细胞共作用6h已造成胃粘膜细胞损伤。后续实验据此设立时不加菌组(6h)、6小时加菌组(6，h)。、尽刃勿ri对原代培养的人胃粘膜细胞PG蛋白表达的影响加菌组胃粘膜细胞PGA蛋白表达(247.肚104.5u留lL)高于对39.升lo7.sug/比，p=0.90)，pGC蛋白表达(43.肚53.3ug/IL)高于对.2士23.6ug/IL，P=0.56)(图5)。各组间差异无统计学意义。表1，加菌组及对照组的PG蛋白表达(u留几)PG分组例数均数士标准差pPGA247.0士104.5239.7士107.80.90000只一︸006’6h6h’h6h
【参考文献】：
期刊论文
[1]Serum pepsinogen levels and their influencing factors:A population-based study in 6990 Chinese from North China[J]. Li-Ping Sun, Yue-Hua Gong, Lan Wang, Yuan Yuan Cancer Institute, First Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110001, Liaoning Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(48)
[2]Female hepatology:Favorable role of estrogen in chronic liver disease with hepatitis B virus infection[J]. Ichiro Shimizu,Nao Kohno,Katsuyoshi Tamaki,Masayuki Shono. World Journal of Gastroenterology. 2007(32)
[3]幽门螺杆菌CagA+菌株对BGC-823细胞系Cx43表达及细胞增殖的影响[J]. 徐灿霞,齐艳美,杨文斌,王芬,周建党,沈守荣. 中南大学学报(医学版). 2007(02)
[4]一种简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法[J]. 程永波,房殿春,郭立萍,王自强,罗元辉,周建嫦. 胃肠病学. 2007(01)
[5]胃蛋白酶原C基因插入-缺失多态与胃癌患者及其癌前疾病易感性的关系[J]. 孙丽萍,郭晓临,张晔,陈威,白雪蕾,刘瑾,袁媛. 中华医学杂志. 2006(43)
[6]幽门螺杆菌相关性胃疾病胃蛋白酶原C的表达研究[J]. 宁佩芳,刘惠杰,袁媛. 世界华人消化杂志. 2004(05)
[7]Association between pepsinogen C gene polymorphism and genetic predisposition to gastric cancer[J]. Hui-Jie Liu Xiao-Lin Guo Ming Dong Lan Wang Yuan Yuan Cancer Institute,First Affiliated Hospital,China Medical University,Shenyang,110001,Liaoning Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2003(01)
本文编号：3400562
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