高迁移率族蛋白-1和Toll样受体4在肠道缺血/再灌注损伤中的作用

发布时间：2021-09-25 01:58

　　背景：肠道是具有重要的免疫、内分泌和屏障功能的器官。肠道缺血再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤被认为是引起急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）、全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）和多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome,MODS）的重要原因,但是其具体机制仍存在很多的争议。传统的细菌移位理论并不能解释许多疑问,己备受质疑。“肠-淋巴”途经理论已越来越受到关注,肠淋巴液的成分还不是很明确。Toll样受体4（Toll like receptor4,TLR4）与肠道I/R损伤关系密切,抑制Toll样受体4介导的信号通路激活可能会对肠道I/R的原位损伤和其所致的远隔组织损伤具有一定保护作用。目的：本研究通过基因缺陷的动物模型,研究肠系膜淋巴液中的成分以及TLR4信号传导通路在肠道I/R损伤中的作用。方法：首先测定测定肠道I/R大鼠淋巴液的内毒素和HMGB1水平,并测定血浆游离氨基酸水平和肠道黏膜高度和容貌厚度变化。4... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词表（Abbreviation)
前言
实验材料
    1 主要实验试剂
        1.1 内毒素试剂盒
        1.2 细胞因子测定试剂盒
        1.3 HE染色试剂盒
        1.4 Western Blot检测蛋白表达
        1.5 RT-PCR检测基因表达
    2 一般耗材
    3 动物实验耗材和手术器械
        3.1 实验耗材
        3.2 手术器械
    4 主要仪器设备
        4.1 一般仪器
        4.2 HE染色中用到的仪器
        4.3 ELISA检测相关
        4.4 Western Blot检测相关仪器
        4.5 RT-PCR检测仪器
研宄内容和方法
    1 研究设计
    2 大鼠肠道缺血再灌注及淋巴液和血清收集
        2.1 动物分组
        2.2 肠道缺血再灌注
        2.3 取材
    3 小鼠TLR4与HMGB1及下游信号途径的研宄
        3.1 动物分组
        3.2 术前准备
        3.3 尾静脉注射
        3.4 取材
    4 检测指标与方法
        4.1 鲎试剂法内毒素测定
        4.2 血清中细胞因子测定
        4.3 氨基酸分析
        4.4 HE染色和肠道形态观察
        4.5 Western Blot检测蛋白表达水平
        4.6 RT-PCR检测目的基因水平
    5 统计分析
实验结果
    1 肠道I/R大鼠淋巴液和血清测定及组织变化
        1.1 肠道I/R大鼠淋巴液中内毒素水平
        1.2 肠道I/R大鼠淋巴液中HMGBl水平
        1.3 血浆游离氨基酸
        1.4 肠道粘膜形态
    2 TLR4与HMGB1及下游信号途径的研究
        2.1 肠道组织学变化
            2.1.1 小鼠肠道HE染色情况
            2.1.2 小鼠肠道粘膜变化
            2.1.3 小鼠肠道粘膜评分
        2.2 小鼠血清中内毒素水平
        2.3 小鼠血清中细胞因子变化
        2.4 小鼠体内HMGB1水平状况
            2.4.1 小鼠血清中HMGB1水平
            2.4.2 小鼠肠道组织中HMGB1蛋白表达水平
            2.4.3 小鼠肠道组织HMGB1基因表达水平
        2.5 小鼠肠道TLR4传导通路情况
            2.5.1 小鼠肠道MyD88水平
            2.5.2 小鼠肠道TRIF水平
        2.6 小鼠肠道NF-κB蛋白水平
讨论
    1 大鼠肠道淋巴液引流操作
    2 小鼠尾静脉注射技术
    3 血浆游离氨基酸水平
    4 “肠-淋巴”途径在肠道缺血再灌注中的作用
    5 内毒素在肠道缺血再灌注中的作用
    6 内源性配体HMGB1在肠道缺血再灌注中的作用
    7 TLR4传导通路在肠道缺血再灌注中的作用
结论
参考文献
综述
    参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3408864