CD147上调肝星状细胞CXCL1表达的机制研究
发布时间：2021-10-10 09:28
持续的慢性肝损伤导致肝脏正常的细胞功能被破坏,细胞外基质合成与降解失去平衡,最终导致肝纤维化的发生。肝脏受到慢性肝损伤刺激后,肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）活化成α-SMA+收缩型的肌纤维母细胞样细胞,增殖和迁移能力增加,同时释放促炎和促纤维化因子。HSCs也具有免疫功能,能够表达功能性的趋化因子受体和趋化因子,包括CXCL1、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CCL2、CCL3和CCL5。CXCL1,也被称为Groα,是G蛋白偶联受体CXCR2的配体。CXCL1参与HSCs的活化,促进纤维化和血管生成。我们之前的研究表明CD147在肝纤维化和肝硬化组织中表达上调,同时能够促进HSCs的活化。HSCs在活化持续阶段,有增殖和趋化因子/细胞因子释放等细胞表型的变化。然而,目前对于活化HSCs中趋化因子分泌的调控机制仍未完全明了。因此,我们本研究的第一个目的是证实CD147能否调控HSCs分泌趋化因子CXCL1,从而在免疫调控方面理解CD147在HSCs活化及其纤维化发生中的作用。另一方面,我们前期的工作也证明,CD147也在...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠纤维化肝脏组织中HSCs上CXCL1的表达上调Fig1.1CXCL1expressionwasincreasedinfibroticlivertissues（A）RT-PCR检测正常对照和CCl4诱导小鼠肝脏组织中CXCL1的表达（n=5），**p<0.01，GAPDH作为内参；（B）正常对照和CCl4诱导小鼠肝脏组织中CXCL1
空军军医大学硕士学位论文α1(I)胶原的表达增加（图 1.2A，B）。细胞收缩实验检测 LX-2 细胞收缩能力的变化，统计分析凝胶面积从初始状态（白色外圈）到 rCXCL1 刺激 24h 的实验终点状态（白色内圈）收缩的改变，结果显示 rCXCL1 处理后细胞收缩加剧（图 1.2C）。用 CCK-8测定法检测 rCXCL1 对 LX-2 细胞增殖的影响，结果显示与对照组相比，rCXCL1 增强了 LX-2 细胞的增殖能力（图 1.2D）。综上，这些结果表明 rCXCL1 促进 HSCs的活化表型。
图 1.3CD147 与 CXCL1 在活化的 HSCs 上具有共定位Fig 1.3 CXCL1 colocalized with CD147 in activated HSCs正常对照和 CCl4诱导的小鼠（8 周）肝脏组织中的 CD147、CXCL1 和 α-SMA 的免疫荧光染色。箭头表示活化的 HSC 中的 α-SMA（蓝色）、CD147（绿色）和 CXCL1（红色）表达。3.4 CD147 上调 CXCL1 的表达瞬时转染 pcDNA3.1-CD147 质粒到 LX-2 细胞中，western blot 和 RT-PCR 结果显示，CD147 能够上调 LX-2 细胞中的 CXCL1 表达（图 1.4A）。相反，当使用 siRNA干涉 LX-2 细胞中 CD147 时，western blot 和 RT-PCR 结果表明，与无关干涉片段对照组（snc-RNA）相比，沉默 CD147 后降低了 LX-2 细胞中 CXCL1 的表达（图 1.4B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver fibrosis markers of nonalcoholic steatohepatitis[J]. Hirayuki Enomoto,Yukihiro Bando,Hideji Nakamura,Shuhei Nishiguchi,Masafumi Koga. World Journal of Gastroenterology. 2015(24)
[2]Reversibility and heritability of liver fibrosis:Implications for research and therapy[J]. Hussein M Atta. World Journal of Gastroenterology. 2015(17)
[3]Inflammatory microenvironment and expression of chemokines in hepatocellular carcinoma[J]. Ke-Qi Han,Xue-Qun He,Meng-Yu Ma,Xiao-Dong Guo,Xue-Min Zhang,Jie Chen,Hui Han,Wei-Wei Zhang,Quan-Gang Zhu,Hua Nian,Li-Jun Ma. World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[4]CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立[J]. 杨绍兴,汤传昊,王思涵,宋三泰,刘晓晴. 中国肺癌杂志. 2012(12)
硕士论文
[1]Basigin1/CD147在癌发生中的作用研究[D]. 袁林.第四军医大学 2015
本文编号：3428111
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠纤维化肝脏组织中HSCs上CXCL1的表达上调Fig1.1CXCL1expressionwasincreasedinfibroticlivertissues（A）RT-PCR检测正常对照和CCl4诱导小鼠肝脏组织中CXCL1的表达（n=5），**p<0.01，GAPDH作为内参；（B）正常对照和CCl4诱导小鼠肝脏组织中CXCL1
空军军医大学硕士学位论文α1(I)胶原的表达增加（图 1.2A，B）。细胞收缩实验检测 LX-2 细胞收缩能力的变化，统计分析凝胶面积从初始状态（白色外圈）到 rCXCL1 刺激 24h 的实验终点状态（白色内圈）收缩的改变，结果显示 rCXCL1 处理后细胞收缩加剧（图 1.2C）。用 CCK-8测定法检测 rCXCL1 对 LX-2 细胞增殖的影响，结果显示与对照组相比，rCXCL1 增强了 LX-2 细胞的增殖能力（图 1.2D）。综上，这些结果表明 rCXCL1 促进 HSCs的活化表型。
图 1.3CD147 与 CXCL1 在活化的 HSCs 上具有共定位Fig 1.3 CXCL1 colocalized with CD147 in activated HSCs正常对照和 CCl4诱导的小鼠（8 周）肝脏组织中的 CD147、CXCL1 和 α-SMA 的免疫荧光染色。箭头表示活化的 HSC 中的 α-SMA（蓝色）、CD147（绿色）和 CXCL1（红色）表达。3.4 CD147 上调 CXCL1 的表达瞬时转染 pcDNA3.1-CD147 质粒到 LX-2 细胞中，western blot 和 RT-PCR 结果显示，CD147 能够上调 LX-2 细胞中的 CXCL1 表达（图 1.4A）。相反，当使用 siRNA干涉 LX-2 细胞中 CD147 时，western blot 和 RT-PCR 结果表明，与无关干涉片段对照组（snc-RNA）相比，沉默 CD147 后降低了 LX-2 细胞中 CXCL1 的表达（图 1.4B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver fibrosis markers of nonalcoholic steatohepatitis[J]. Hirayuki Enomoto,Yukihiro Bando,Hideji Nakamura,Shuhei Nishiguchi,Masafumi Koga. World Journal of Gastroenterology. 2015(24)
[2]Reversibility and heritability of liver fibrosis:Implications for research and therapy[J]. Hussein M Atta. World Journal of Gastroenterology. 2015(17)
[3]Inflammatory microenvironment and expression of chemokines in hepatocellular carcinoma[J]. Ke-Qi Han,Xue-Qun He,Meng-Yu Ma,Xiao-Dong Guo,Xue-Min Zhang,Jie Chen,Hui Han,Wei-Wei Zhang,Quan-Gang Zhu,Hua Nian,Li-Jun Ma. World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[4]CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立[J]. 杨绍兴,汤传昊,王思涵,宋三泰,刘晓晴. 中国肺癌杂志. 2012(12)
硕士论文
[1]Basigin1/CD147在癌发生中的作用研究[D]. 袁林.第四军医大学 2015
本文编号：3428111
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3428111.html
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