氧化苦参碱对脂多糖诱导的胰腺星状细胞TLR4/NF-κB信号通路的调节作用

发布时间：2021-10-14 06:29

　　目的:观察氧化苦参碱（oxymatrine,OM）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的胰腺星状细胞（LTC-14细胞株）中对Toll样受体4（toll-like receptor 4,TLR4）通路中相关细胞因子的影响。其中包括:TLR4、髓样细胞分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）、核转录因子-kappa B（nuclear factor kappa B,NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）在基因和蛋白水平的表达变化。探讨OM治疗慢性胰腺炎（chronic pancreatitis,CP）纤维化的可能分子机制。方法:将LTC-14细胞株分为4个组,Control组,LPS组,OM+LPS组,OM组。Control组:加无血清无双抗的培养基培养3h。LPS组:加入含浓度为10μg/ml LPS的无血清无双抗的培养基孵育3h;OM+LPS组:先加入500μg/ml的OM在无血清无双抗的培养基中孵育30min,然后加入浓度为10μg/ml LPS继续刺... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

免疫荧光观察OM在LPS诱导LTC-14细胞中TLR4表达的影响

A 发红色荧光为 TLR4，显示的是目标条带；发蓝色荧光为 DAPI，显示的是 LTC-14 细胞核。2.2 免疫细胞化学技术检测 OM 在 LPS 刺激 TLC-14 细胞中对 NF-κB 细胞核内易位的影响细胞免疫化学技术结果显示：Control 组(图 2 A)：NF-κB 在 LTC-14 细胞内均质表达； LPS 组(图 2 B)：NF-κB 表达细胞核内明显，包浆内表达量明显减少；OM+LPS 组(图 2 C)：细胞浆中 NF-κB 均质表达，较 Control 组无明显区别；OM组(图 2 D)：NF-κB 在细胞核内表达量很少，仅在包浆中大量表达。

2.3 Western blot 研究 OM 对 LPS 诱导 LTC-14 细胞中 TLR4、MyD88、NF-κB达情况的影响。2.3.1 Western blot 方法观察 OM 对 LPS 诱导 LTC-14 细胞中 TLR4 蛋白表达：通过 Western blot 方法可以观察到：TLR4 在 LTC-14 细胞中表达，LPS 组Control 组表达量明显升高（p<0.01），OM+LPS 组和 LPS 组相比较，能显著降TLR4 的表达，差异有统计学意义（p<0.01）。OM 和 Control 组比较，无统计差异。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3435625