东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及研究

发布时间：2021-10-18 14:20

　　目的：非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）发病率逐年增高,且有进展到肝纤维化肝硬化的趋势,目前其确切的发病机制尚不清楚。我们在以往的实验中发现东方田鼠有易发脂肪肝的倾向,因此建立东方田鼠非酒精性脂肪肝模型,利用SMART （Switching Mechanism at 5’end of RNA Transcript, RNA5’端转录机制）技术构建了东方田鼠肝脏cDNA （complementary DNA,互补DNA）质粒文库,在此基础上筛选与东方田鼠脂肪肝发病相关的基因,并获得其全长序列,为进一步研究非酒精脂肪肝发病机制奠定基础。方法：选取105只6周龄洞庭湖种群雄性东方田鼠,随机分成三组,每组35只,分别为对照组、模型组1和模型组2,各组分别饲喂高纤维料（在大小鼠基础料的基础上加粗纤维,使粗纤维含量为10%,粗脂肪含量为3%）、高脂料（在大小鼠基础料的基础上加5%猪油、0.5%胆固醇和0.1%胆盐）、大小鼠基础料。各组分别于造模开始后第2、4、6、8、12周处死,称量体重及肝重,计算肝指数,采血检测东方田鼠血清丙氨酸转氨酶... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肝脏的组织病理学变化(HE，x20)

熔解曲线均符合以上标准，如CYPZEI的熔解曲线。见图3。实时荧光定量PCR的结果显示，模型组1的CYPZEI的表达量不断增高，在6周时较对照组显著增高(尸<0.05)，且随着时间的延长表达量在6周时也显著增高(P<0.05);ECHSI的表达量不断增高，在4周时较对照组显著增高(尸<0.05)，6周突然降低，8周后又显著增高(尸<0.05);CYPZDS的表达量不断增高，在2周时较对照组显著增高(尸<0.05)，除4周稍降低外，随着时间的延长表达量也显著增高(P<0.05);CYPZa3a的表达量不断增高，在6周时较对照组显著增高(尸<0.05)，且随着时间的延长表达量在6周时也显著增高(尸<0.05);PGC一1的表达量不断增高，在4周时较对照组显著增高(尸<0.05)，除在4周显著降低(尸<0.05)外，随着时间的延长表达量在6周后显著增高(P<0.05);SC4MOL、Adipor和AMPK一1的表达量开始时与对照组相比升高(p<0.05)，但随着饲养时间的延长其表达量显著降低(P<0.05);模型组2的各基因表达趋势不明显。详见图4一11。

图4Real一timePCR检测各组在不同时间内CYPZEI表达差异注:*表示模烈组1与对照组相比实验组在0.05水平差异显著;小写字母不同表示同一组在不同时间段在0.05水平上差异显著ECHSIlllllllll:::::::::::::::::::鬓鬓鬓鬓鬓鬓鬓.对照组口模型组圈模型组斤!月0工JJd凭︹J口JJ.占n︸泪排耀友爷囿喇皿46812

【参考文献】：
期刊论文
[1]PGC-1α与非酒精性脂肪肝病关系的研究进展[J]. 方诗蓉,傅玉才,周小辉.  国际消化病杂志. 2009(06)
[2]SREBPs的调节及在非酒精性脂肪肝形成机制中的研究进展[J]. 杜娆,谢梅林.  中国药理学通报. 2009(11)
[3]非酒精性脂肪肝的实验研究进展[J]. 翁小刚,朱晓新,杨庆,李玉洁.  中国实验方剂学杂志. 2009(11)
[4]非酒精性脂肪性肝病患者血清IL-18、IL-8水平变化及意义[J]. 程勇,赵亚敏,苏剑,尹体英.  山东医药. 2009(39)
[5]全长cDNA文库构建方法及应用研究[J]. 朱利军,长孙东亭,罗素兰.  海南大学学报(自然科学版). 2009(02)
[6]获取基因全长c DNA策略及应用[J]. 邵珏,邵玉锁,曹明富.  健康研究. 2009(02)
[7]瘦素对非酒精性脂肪肝病的影响[J]. 范挺.  内江科技. 2009(02)
[8]饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠脂联素受体2基因的表达及其意义[J]. 王彦,施雪清,王琳琳,赵赫男.  大连医科大学学报. 2008(06)
[9]非酒精性脂肪性肝病和固醇调节元件结合蛋白1c[J]. 王光丽,周小辉,傅玉才.  肝脏. 2008(03)
[10]SMART技术构建亚麻韧皮部全长cDNA文库[J]. 龙松华,陈信波,邓欣,高原.  中国麻业科学. 2008(03)



本文编号：3442951