HBV-Tg小鼠原代肝细胞培养及HBV/HLA-A2.1小鼠的初步应用

发布时间：2021-10-25 01:08

　　背景一、乙肝感染是严重威胁人类健康的传染性疾病,并且是导致肝纤维化、肝硬化的主要原因。虽然近些年乙肝疫苗的有效接种大大降低了乙肝的发生率,但全世界仍有大约3500万的慢性感染者。因此对乙肝的发病机理、诊断、预防及治疗等研究仍需要我们大力的开展。目前乙肝研究的体外细胞模型以癌系细胞为主,如HepG2.2.15细胞。虽然其可以稳定分泌HBsAg、HBeAg、Dane颗粒,并可检测到胞内HBV-DNA等优点,但其毕竟是癌系细胞,无法表现出非癌性肝细胞的生理活性,经过长期的传代培养,其表面很重要的药物代谢酶CYP450的表达明显降低,无法很好的对一些有抗病毒效果的药物进行筛选。原代肝细胞培养为药物生物转化途径的研究、寻找药物可能的代谢物提供了一个简单和有效的模型。实践证明了原代肝细胞已经成为CYP450酶密切相关的实验模型。二、乙肝为何易慢性化及如何改变乙肝的慢性化发展是目前国内外乙肝研究的热点,也是难点。有人研究,乙肝之所以易慢性化,是由于乙肝病毒本身抗原物质可以逃避机体的特异性细胞免疫攻击而产生免疫耐受。如何能够打破乙肝患者对乙肝病毒的免疫耐受成为阻断乙肝慢性化的关键。乙肝治疗性免疫疫苗就... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HBVTg小鼠原代肝细胞谷丙转氨酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶水平

))))))))))) {{{{{{{{{{{{{{{ {{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{口 口口 口口 口 口口 HBsAggg攀 攀攀 攀攀 攀攀攀攀攀攀攀 盆 盆盆 盆盆 盆盆盆盆盆 盆盆盆盆 价 价价 价价 价价 价价 价价价价 ︵掣吕.斗书比V山叨)H图4a:HBv一Tg小鼠7d上清的HBsAg表达水平。 3.SOE+04 3.OOE+04 2.SOE+04 2.OOE+04 1.SOE+04 1.OOE+04 5.OOE+03 0.OOE+00 )))))))))))))))))))口 口 口口HB卜 DNAAA龚 龚龚龚龚 龚龚龚 袭 袭袭 袭袭袭袭袭袭袭 落 落落 落落落落落 落 ︵工\ul卜do斗书曰卜VNO一A巴国天数图 4b:HBV一Tg小鼠7d上清的HBV一DNA表达水平。1.4.4酒精对野生型Baib/c小鼠与HBv-Tg小鼠原代肝细胞的氧化应激损伤两种不同小鼠原代肝细胞与不同浓度酒精之间存在交互作用。铺板24h的原代肝细胞经不同浓度酒精 (0.13%，0.5%，2%，8%)损伤16h后，检测细胞培养上清AST，两种小鼠的AST水平总体趋势是随着酒精浓度的升高，细胞释放到培养基中的AST逐渐升高。计算两组细胞的特异细胞毒性率。结果示HBV-

HBsAg在第1天表达最高，随后逐渐降低，直到第5天仍能保持在一个较高水平，从第6天开始显著降低(图4a)。HBV-DNA第1天水平较高，从第3天到第7天开始下降，统计学有显著性差异，并保持稳定状态(图4b)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]过氧化作用与肝脏疾病[J]. 朱润芝,李京敬,谢超,郜尽,胡建军,袁运生,韩伟,俞雁.  世界华人消化杂志. 2010(11)
[2]酒精对HBV转基因小鼠肝脏的损伤作用及其机制[J]. 黄娟娟,李兵,曹力波,欧阳林旗,刘世坤.  中国药理学通报. 2010(03)
[3]治疗性乙肝疫苗研究新进展与新策略[J]. 易学瑞,袁有成,孔祥平.  中国药师. 2009(09)
[4]病毒和持续酒精刺激诱发肝细胞癌的分子水平研究进展[J]. 胡康洪,孙殿兴.  中华实验和临床感染病杂志(电子版). 2008(04)
[5]乙醇肝毒性及治疗的研究进展[J]. 李灏,姜颖,贺福初.  中国药理学与毒理学杂志. 2008(05)
[6]复制型HBV转基因小鼠遗传稳定性研究[J]. 孔祥平,吴庆洲,罗显荣,胡莲美,李秀梅,易学瑞,佟明华,周军辉,刘光泽.  中国生物工程杂志. 2008(05)
[7]脂类分子内佐剂Th/CTL多表位肽体内诱导HLA-A2转基因鼠HBV特异性CTL应答的研究[J]. 石统东,吴玉章,任红.  第三军医大学学报. 2006(18)
[8]主要组织相容性复合体（MHC）研究进展[J]. 马丽颖,岳秉飞.  中国比较医学杂志. 2005(03)
[9]Identification of an HLA-A* 0201-restricted CD8+ T-cell epitope SSp-1 of SARS-CoV spike protein[J]. Wang B, Chen H, Jiang X, Zhang M, Wan T, Li N, Zhou X, Wu Y, Yang F, Yu Y, Wang X, Yang R, Cao X(Institute of Immunology, Second Military Medical University, Sh anghai 200433,China).  第二军医大学学报. 2004(09)
[10]乙型肝炎病毒抗原表位模拟多肽诱导CTL应答的研究（英文）[J]. 石统东,吴玉章,边疆,贾正才,周伟,邹丽云.  免疫学杂志. 2003(03)



本文编号：3456351