溃疡性结肠炎菌群变化对肠上皮细胞TLRs表达影响

发布时间：2017-05-05 08:04

  本文关键词：溃疡性结肠炎菌群变化对肠上皮细胞TLRs表达影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过分离培养肠黏膜上皮细胞,给予不同构成比例的肠道内容物及特异性TLR抗体,检测对比肠黏膜上皮细胞TLR4、NF-κB的表达和细胞因子的变化,直观验证不同肠道内容物及TLR抗体对TLR介导的免疫反应的影响。方法:选用体质量在300g左右的健康大鼠20只,随机分为正常组(n=10)和UC组(n=10),于造模后第4天处死,取结肠段进行细胞培养,用不同构成比例的细菌或干预措施处理肠黏膜上皮细胞后,分别进行不同干预并分成相应分组:A组:对照组(无干预);B组:正常肠道腔内菌群组(加入正常肠肠腔黏膜冲洗液);C组:正常肠道膜菌群组(加入正常肠肠黏膜混悬液);D组:UC模型肠腔内菌群组(加入UC动物模型肠腔黏膜冲洗液);E组:UC模型肠粘膜菌群组(加入UC动物模型肠黏膜混悬液);F组:抗TLR抗体组(加入抗TLR抗体)。再收集细胞检测TLR4、NF-κB的表达,收集上清液检测细胞因子IFN-γ、IL-1β水平。结果:D、E组与A组相比较,TLR4、NF-κBmRNA及蛋白水平和IFN-γ、IL-1β炎症因子水平明显升高,D、E组分别与B、C组相比TLR4、NF-κBmRNA及蛋白水平和IFN-γ、IL-1β炎症因子水平明显升高,A组与B、C组相比较无统计学意义,F组与D组比较TLR4mRNA、NF-κB蛋白水平明显下降,NF-κBmRNA、TLR4蛋白水平、IFN-γ、IL-1β炎症因子水平无明显改变,F组与E组比较TLR4mRNA、TLR4和NF-κB蛋白水平、IFN-γ炎症因子水平降低,NF-κBmRNA、IL-1β炎症因子水平无明显改变。结论:UC的异常免疫反应的发生可能与肠道内容物的刺激有关,且TLR4单克隆抗体在一定程度上可下调TLR4介导的免疫途径及其部分下游炎症因子,进而抑制免疫反应的发生。
【关键词】：溃疡性结肠炎(UC) Toll样受体4(TLR4) 核因子κB(NF-κB) 干扰素γ(IFN-γ) 白细胞介素1β(IL-1β)
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574.62
【目录】：

• 摘要7-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 研究内容与方法12-24
• 1. 研究对象及方法12
• 1.1 实验动物分组12
• 1.2 动物实验方法12
• 1.3 取材及标本保存12
• 2. 实验所需主要试剂及仪器12-13
• 2.1 主要试剂12
• 2.2 主要仪器12-13
• 3. 实验检测方法13-22
• 4. 统计学处理22-23
• 5 技术路线图23-24
• 结果24-32
• 讨论32-37
• 小结37-38
• 致谢38-39
• 参考文献39-44
• 综述44-52
• 参考文献49-52
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文52-53
• 导师评阅表53

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