CREB-1在TGF-β3抗肝纤维化中的作用

发布时间：2021-11-05 20:46

　　目的：通过观察外源性转化生长因子β3（TGF-β3）对大鼠肝星状细胞（HSC）中TGF-β3启动子活性和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白-1（CREB-1）的影响，研究TGF-β3自反馈调节信号通路中正向调节因子。方法：（1）构建并检测TGF-β3启动子和CRE位点突变的TGF-β3启动子荧光素酶报告基因质粒（PGL3-TGFβ3-P和PGL3-TGFβ3-MP），并判断脂质体转染法对细胞形态的影响；（2）用外源性TGF-β3诱导大鼠HSC细胞，2h后提取总RNA，通过实时荧光定量PCR法测定对照组和实验组中TGF-β3mRNA的表达情况；（3）用外源性TGF-β3诱导转染了PGL3-TGFβ3-P的大鼠HSC细胞，于不同时间点，用荧光素酶报告基因分析法检测TGF-β3启动子活性；（4）将TGF-β3启动子上的CRE结合位点基因突变，并将该突变的报告质粒与正常质粒一起转染与大鼠HSC细胞，加/不加TGF-β3进行诱导，通过荧光素酶报告基因分析法检测启动子的活性；（5）用外源性TGF-β3诱导大鼠HSC细胞，于不同时间点提取核蛋白，通过电泳迁移率分析法（EMSA）检测各时间点磷酸化CREB... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：156 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略词表
前言
    参考文献
摘要
ABSTRACT
第一部分 CREB-1对大鼠肝星状细胞中TGF-β3自反馈调节的影响
    前言
    材料及方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 CREB-1对大鼠肝星状细胞中TGF-β3诱导smad7表达的影响
    前言
    材料及方法
    结果
    讨论
    参考文献
综述
    参考文献
附录1 （国外学习期间完成课题的相关内容）
附录2 （攻读学位期间发表和拟发表论文、著书及课题）
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]重组2型腺相关病毒-转化生长因子β3对实验性肝纤维化大鼠肝脏组织病理学和Ⅰ型胶原表达的影响[J]. 刘萍,高晓亮,余姣,钱伟,徐可树.  中华肝脏病杂志. 2009 (06)



本文编号：3478484