胃食管反流通过NFκB介导的炎症破坏小鼠食管粘膜屏障功能

发布时间：2021-11-19 23:57

　　研究背景和目的：食管上皮屏障功能是食管粘膜对抗胃食管反流的重要防御机制。胃食管反流可诱导食管上皮屏障功能的损伤,食管粘膜对特定离子以及大分子通透性的增强以及上皮细胞间隙的增宽。因此,理解反流诱导的食管粘膜屏障功能损伤的机制对寻求胃食管反流病的有效干预措施具有重要的临床意义。Barrett食管是胃食管反流病的继发病变之一,但胃食管反流进展为Barrett食管的分子机制至今还不清楚。本研究的目的1)探讨NFκB介导的炎症在胃食管反流诱导食管粘膜屏障功能损伤中的作用；2)探讨胃食管反流病进展为Barrett食管的分子机制。研究方法：建立手术诱导的胃反流,十二指肠反流和胃十二指肠混合反流的小鼠模型.使用mini-Ussing chamber检测各反流食管粘膜跨上皮电阻抗值,利用电镜观察并比较各型反流食管粘膜上皮间隙的改变。应用基因芯片技术检测各型反流食管粘膜上皮内特异的基因表达谱,再利用生物信息学分析策略（例如GSEA和SAM）筛选出表达上调或者下调的转录因子,激活的经典信号传导通路以及具有相似功能的基因簇,同时也筛选出基因组内所有表达上调或者下调的基因。采用Real-time PCR,免疫印... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：133 页

【学位级别】：博士

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英文缩略词
第一章 胃食管反流通过NFκB介导的炎症破坏小鼠食管粘膜屏障功能
    1.1 绪论
    1.2 材料和方法
        1.2.1 手术构建胃食管反流小鼠模型
        1.2.2 食管粘膜TEER的检测
        1.2.3 食管粘膜电镜观察
        1.2.4 RNA的抽提
        1.2.5 基因芯片
        1.2.6 Real-time PCR分析
        1.2.7 蛋白的抽提
        1.2.8 免疫印迹
        1.2.9 ELISA
        1.2.10 免疫组织化学染色
        1.2.11 组织化学染色以及炎症细胞的半定量分析
        1.2.12 NFκB抑制试验
        1.2.13 统计学方法
    1.3 实验结果
        1.3.1 胃食管反流诱导小鼠食管粘膜TEER的下降以及DIS
        1.3.2 胃食管反流食管粘膜特征性基因表达谱
        1.3.3 胃食管反流食管粘膜上皮紧密连接蛋白基因表达
        1.3.4 胃食管反流食管粘膜上皮内NFκB以及NFκB下游基因的表达
        1.3.5 胃食管反流食管粘膜炎症细胞的浸润以及炎症趋化因子的表达和释放
        1.3.6 抑制粘膜内NFκB可减弱胃食管反流食管粘膜屏障功能的损伤
        1.3.7 胃食管反流诱导食管粘膜Barrett食管相关基因的表达
    1.4 实验讨论
        1.4.1 胃食管反流破坏食管粘膜上皮屏障功能以及相关病理生理机制的探讨
        1.4.2 NFκB相关的炎症因子诱导反流食管粘膜上皮屏障功能的损伤
        1.4.3 炎症细胞诱导反流食管粘膜上皮屏障功能的损伤
        1.4.4 NFκB介导的基质金属蛋白酶参与反流食管粘膜上皮屏障功能的损伤
        1.4.5 胃食管反流是诱发Barrett食管的重要因素
        1.4.6 探讨反流食管粘膜屏障功能损伤的机制以及本研究的临床意义
    1.5 实验结论
参考文献
综述一
    参考文献
综述二
    1. 不同模型动物的食管特点
    2. 诱导胃食管反流的外科手术术式
    3. 转基因动物模型和转基因动物联合外科手术模型
    4. 大动物（犬和猪）作为巴雷特食管和食管腺癌的动物模型
    5. 展望
    参考文献
    附图
攻读学位期间主要研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Endoscopic submucosal dissection training with pig models in a Western country[J]. Adolfo Parra-Blanco,María Rosa Arnau,David Nicolás-Pérez,Antonio Z Gimeno-García,Nicolás González,Juan A Díaz-Acosta,Alejandro Jiménez,Enrique Quintero.  World Journal of Gastroenterology. 2010(23)
[2]MicroRNAs, development of Barrett’s esophagus, and progression to esophageal adenocarcinoma[J]. Cameron M Smith,David I Watson,Michael Z Michael,Damian J Hussey.  World Journal of Gastroenterology. 2010(05)
[3]Effect of Lonicerae Flos extracts on reflux esophagitis with antioxidant activity[J]. Sae-Kwang Ku,Bu-Il Seo,Ji-Ha Park,Gyu-Yeol Park,Young-Bae Seo,Jae-Soo Kim,Hyeung-Sik Lee,Seong-Soo Roh.  World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[4]Role of bile acids, prostag landins and COX inhibitors in chronic esophagitis in a mouse model[J]. C Poplawski,D Sosnowski,A Szaflarska-Pop（?）awska,J Sarosiek,R McCallum,Z Bartuzi.  World Journal of Gastroenterology. 2006(11)
[5]Superoxide dismutase prevents development of adenocarcinoma in a rat model of Barrett’s esophagus[J]. Elena Piazuelo,Carmelo Cebrián,Alfredo Escartín,Pilar Jiménez,Fernando Soteras,Javier Ortego,Angel Lanas.  World Journal of Gastroenterology. 2005(47)
[6]Impact of endoscopically minimal involvement on IL-8 mRNA expression in esophageal mucosa of patients with non-erosive reflux disease[J]. Yusei Kanazawa,Hajime Isomoto,Vladimir A Saenko,Akira Ohtsuru,Fuminao Takeshima,Katsuhisa Omagari,Yohei Mizuta,Ikuo Murata,Shunichi Yamashita,Shigeru Kohno.  World Journal of Gastroenterology. 2003(12)



本文编号：3506145