CX3CL1/CCL26-CX3CR1通路在原发性胆汁性胆管炎发病机制中的作用

发布时间：2021-11-28 05:25

　　目的 探究CX3CL1/CCL26-CX3CR1通路在原发性胆汁性胆管炎（Primary Biliary Cholangitis,PBC）发病机制中的作用。方法 收集PBC患者和健康对照外周血标本,分离血浆和外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs）。采用 ELISA 法检测血浆 CX3CL1和CCL26水平,通过流式细胞分析术测定PBMC各淋巴细胞亚群表面CX3CR1和CCR3的表达情况。通过Transwell体系检测CX3CL1和CCL26对各淋巴细胞亚群的趋化作用。利用流式细胞内染色技术测定膜结合型CX3CL1、游离型CX3CL1和CCL26刺激各淋巴细胞亚群分泌IFN-γ和IL-4的能力。结果 共纳入PBC患者59例,平均年龄51.7±2.8岁,女性与男性比例53:6。纳入年龄、性别与患者基本匹配的健康对照54例。PBC患者CD4+T细胞CX3CR1表达水平显著高于健康对照（17.0±13.0%vs7.8±3.6%,p<0.001）,且这一差异主要来自于其 CD28-的非功能亚群（65.9±22.3%vs36.0±... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１?ＣＸ３ＣＬ１?ＥＬＩＳＡ标准品倍比稀释示例??

（图片来源：Ｒ＆Ｄ?Ｓｙｓｔｅｍｓ?ＣＣＬ２６?ＥＬＩＳ?Ａ试剂盒说明书）??３．３．４样品检测??（１）每孔加入１０（＾１样品或标准品，每个样品均设置副孔，记录每孔样品信息，??１５ｍｉｎ内完成加样；??（２）用薄膜密封，室温下孵育２小时；??（３）洗板机洗板：每孔洗４遍，每遍３００［〇１?Ｗａｓｈ?Ｂｕｆｆｅｒ，浸泡３０ｓ。最后一遍洗??完后，将９６孔板倒扣于吸水纸上，用力拍打使９６孔板充分印干；??（４）排枪每孔加入１００＾１?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?Ａｎｔｉｂｏｄｙ，用新的薄膜密封，室温下孵育２小??时；??（５）重复步骤３中的洗板过程；??（６）排枪每孔加入１０〇ｎｌＳｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ＨＲＰ工作液，用新的薄膜密封，室温下避光??孵育２０ｍｉｎ；??（７）配置?Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ?Ｓｏｌｕｔｉｏｎ?（ｌｘ）：避光，Ｃｏｌｏｒ?Ｒｅａｇｅｎｔｓ?Ａ?和?Ｂ?各取?１２ｍｌ?等体积??混合，１５ｍｉｎ内使用；??

技术路线图

【参考文献】：
期刊论文
[1]Primary biliary cirrhosis: From bench to bedside[J]. Elias Kouroumalis,George Notas.  World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics. 2015(03)
[2]Chemokines and Chemokine Receptors:Their Manifold Roles in Homeostasis and Disease[J]. Pablo Iribarren.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)



本文编号：3523795