二氢杨梅素通过铁自噬途径抑制铁过载诱导的肝星状细胞活化

发布时间：2021-12-17 07:21

　　目的:观察二氢杨梅素（Dihydromyrieetin,DMY）对柠檬酸铁胺（ferric ammonium citrate,FAC）诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞活化的影响及机制,为肝纤维化的防治提供新的思路和线索。方法:培养大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞,先用细胞自噬诱导剂雷帕霉素（100 nmol/L）预处理HSC-T6细胞0.5 h,再用含FAC（400μmol/L）和不同浓度的DMY（10、20、40、80、160和320μg/mL）处理HSC-T6细胞24 h。实验分为以下各组:空白对照组、FAC组、不同浓度的DMY干预组、FAC组+不同浓度DMY组、雷帕霉素预处理组。采用MTT法检测细胞活力,普鲁士蓝染色观察细胞内铁沉积,采用ELISA法检测细胞培养液上清中透明质酸（Hyaluronic acid,HA）、层粘连蛋白（Laminin,LN）、三型前胶原（ProcollagenⅢ,PCⅢ）和IV型胶原（Collagen IV,IV-C）水平,采用比色法检测细胞内总铁水平,采用透射电镜观察HSC-T6的超微结构。采用Western Blot检测HSC-T6细胞中NCO... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DMY、FAC和细胞自噬诱导剂雷帕霉素对HSC-T6细胞活力的影响

DMY 对 FAC 诱导肝星状细胞活化的影响用 10、20、40、80、160 和 320 μg/mL DMY 和 400 μmol/L 柠檬酸铁胺（ HSC-T6 细胞 24 h。采用 Western bolt 检测肝星状细胞活化的标记蛋白肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果如图 3-2 和表 3-2 所示：与空白对照FAC 组细胞中 α-SMA 蛋白表达显著性增加（P<0.05）；与 FAC 组比 （20、40、80、160 和 320 μg/mL）+FAC 组细胞中 α-SMA 蛋白表达低（P<0.05）。DMY （10 μg/mL）+FAC 组与 FAC 组比较细胞中 α-表达没有显著性差异（P>0.05）。与空白对照组比较，DMY（10、2060 和 320 μg/mL）处理也没有明显影响细胞中 α-SMA 蛋白表达（P>0

3.4 DMY 对 FAC 诱导 HSC-T6 细胞铁过载的影响3.4.1 DMY 对 FAC 诱导 HSC-T6 细胞内铁沉积的影响用 10、20、40、80、160 和 320 μg/mL DMY 和 400 μmol/L 柠檬酸铁胺（FAC）处理 HSC-T6 细胞 24 h。采用普鲁士蓝染色观察细胞内铁沉积的情况。结果如图3-3 所示：与空白对照组比较，FAC 组细胞内铁沉积水平（染成蓝色的铁颗粒）明显增加；与 FAC 组比较，DMY （20、40、80、160 和 320 μg/mL）+FAC 组细胞内铁沉积水平显著性降低。DMY （10 μg/mL）+FAC 组与 FAC 组比较细胞内铁沉积水平没有明显差异。与空白对照组比较，DMY（10、20、40、80、160和 320 μg/mL）处理也没有明显影响细胞内铁沉积水平。

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3539645