P18/LAMTOR1调控mTORC1在非酒精性脂肪性肝炎作用机制的研究

发布时间：2021-12-31 04:56

　　目的:非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）是全球范围内非常常见的一种慢性肝脏疾病,其发病机制以肝脏内脂质过量蓄积、肝细胞脂肪性变性、肝细胞脂质过氧化和氧化应激及肝内炎症细胞浸润为主要特征。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）为细胞增殖、分化和凋亡及蛋白合成等的重要调控因子,也参与NASH病理过程的发生发展。而P18/LAMTOR1的存在与否影响着mTORC1是否能定位于溶酶体膜表面从而被激活继而发挥生理病理作用。本研究重点探究特异性敲除肝脏P18/LAMTOR1基因后对NASH肝组织脂代谢、炎症状态及内质网应激信号通路相关关键信号因子的影响,深入探讨P18/LAMTOR1通过mTORC1影响NASH的作用机制。方法:1.P18/LAMTOR1肝脏特异性敲除小鼠的构建和检测:采用背景为C57BL/6的小鼠品系,利用打靶载体同源重组技术,在肝细胞基因组P18/LAMTOR1外显子两侧各插入一个loxp序列。借助于Cre-Loxp重组酶系统将特定基因敲除,因为Cre蛋白能识别lox... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Ragulator的组成

Ragulator调节mTORC1的表达[17]

eppendorf 管中，4℃保存。2.方法2.1 P18/LAMTOR1 肝脏特异性敲除小鼠的构建和检测我们计划得到 P18/LAMTOR1 基因肝脏特异性敲除（P18/LAMTOR1LKO，Lliver knockout）的小鼠。在此之前，我们首先设计得到 P18/LAMTOR1-floxed 小其策略和基因型检测分别如图 3 和图 4 所示。P18/LAMTOR1 flox 小鼠品系背景为 C57BL/6，利用打靶载体同源重组在 P18/LAMTOR1 基因的外显子两侧各插入一个 loxp 序列。借助于 Cre-loxp酶系统能达到将特定基因敲除的目的，Cre 蛋白能识别 loxp 序列并将两个 lo列中间的基因片段切除。Albumin-Cre 小鼠品系背景为 C57BL/6，原始品系全B6.Cg（Alb-cre）21 Mgn/J，通过在小鼠基因组插入一段同时连有 albumin 启和 Cre 基因的序列，使 Cre 蛋白在肝脏特异性表达。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic and epigenetic variants influencing the development of nonalcoholic fatty liver disease[J]. Yu-Yuan Li.  World Journal of Gastroenterology. 2012(45)
[2]JNKs,insulin resistance and inflammation:A possible link between NAFLD and coronary artery disease[J]. Giovanni Tarantino,Armando Caputi.  World Journal of Gastroenterology. 2011(33)



本文编号：3559655