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hHGF促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究

发布时间:2022-01-11 05:31
  我国有9300万的乙型肝炎病毒携带者,其中2千万人为乙肝患者,酒精性肝病及非酒精性肝病的发病率亦逐年升高,众多慢性肝脏损伤因素导致纤维结缔组织异常增生,引起肝功能失代偿、肝腹水、肝癌、上消化道出血等一系列严重并发症,药物难以医治,肝移植是目前治疗终末期肝病最为有效的方法,但困于肝源缺乏等问题,极大的限制了其临床应用,骨髓间充质干细胞因其无限增殖及多向分化的潜能,有望成为治疗终末期肝病的又一可行方法,并已成为研究热点。源于中胚层的骨髓间充质干细胞具有极强的可塑造性,多项研究表明,其可分化为三个胚层的细胞,如成骨细胞、心肌细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝细胞等。在急慢性肝病中,移植骨髓间充质干细胞进行临床治疗已经在多篇文献中报道,且有多项实验已在动物体内或体外诱导过程中加入各种生长因子,以达到提高干细胞移植疗效的目的,目前尚缺乏转染基因后的骨髓间充质干细胞在体外诱导成肝样细胞的实验研究。有研究表明肝细胞生长因子(HGF)为骨髓间充质干细胞向肝细胞分化最重要的始动因子之一[8] ,HGF作用的发挥同细胞膜受体c-met的结合密不可分。HGF蛋白与其受体c-Met结合后导致c-Metβ链的酪氨酸T... 

【文章来源】:中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

hHGF促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究


hBMSCs的形态学观察(复苏接种后)

细胞,转染,细胞复苏,骨髓间充质干细胞


第三军医大学硕士学位论文density,IOD)值作为结果 IOD 值,计算转染前积分光密度与转染后积分光密度的统计学差异。结 果1.骨髓间充质干细胞的培养将细胞复苏后,放置于 37℃,5%CO2 饱和湿度的培养箱中培养,首次按 1:2 比例接种在培养瓶,接种后倒置显微镜下观察成圆形的悬浮细胞,大约于 3h 后细胞开始贴壁,形态变为三角形及多边形,伸出伪足,24h 后细胞全部贴壁,由多形变为长梭形、纺锤形,细胞数目逐渐增多,细胞间形成联系交织,48h 后细胞成团样、漩涡、鱼群样生长。连续培养传代扩增后备用于细胞转染。

hHGF促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究


筛选后第10天(LM×200)

【参考文献】:
期刊论文
[1]Identification of cytokines involved in hepatic differentiation of mBM-MSCs under liver-injury conditions[J]. Xue-Jun Dong, Hui Zhang, Molecular Medicine Center of Shaoxing People’s Hospital, Shaoxing 312000, Zhejiang Province, China; School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325035, Zhejiang Province, China Ruo-Lang Pan, Li-Xin Xiang, Jian-Zhong Shao, College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China; Key Laboratory for Cell and Gene Engineering of Zhejiang Province, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(26)
[2]肝细胞生长因子基因对BMSCs的修饰及活性观察[J]. 哈小琴,董芳,吕同德.  中国修复重建外科杂志. 2010(05)
[3]急性肝衰竭模型构建及细胞移植途径初探[J]. 刘芳,陈少红,范新娟,唐芳,赵国强.  南华大学学报(医学版). 2006(04)
[4]Therapeutic effect of interleukin-10 on CCI4-induced hepatic fibrosis in rats[J]. Yue-Hong Huang, Mei-Na Shi, Wei-Da Zheng, Li-Juan Zhang, Zhi-Xin Chen, Xiao-Zhong Wang, Department of Gastroenterology, Union Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, Fujian Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(09)
[5]Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells[J]. Claudia Lange,Philipp Bassler,Michael V. Lioznov,Helge Bruns,Dietrich Kluth,Axel R. Zander,Henning C. Fiegel.  World Journal of Gastroenterology. 2005(29)



本文编号:3582187

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