重组hGM-CSF乳酸链球菌对TNBS诱导的大鼠肠损伤的保护作用

发布时间：2022-01-26 08:50

　　研究背景肠道损伤与肠粘膜屏障功能改变密切相关，特别是肠粘膜生物屏障及免疫屏障日渐受到重视。炎症性肠病（Inflammatory Bowl Desease，IBD）包括克罗恩病（Crohn’s disease，CD）和溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）的发病与遗传背景、免疫调节失控和个体差异以及环境因素等多方面原因有关，但最终表现为肠粘膜对肠道微生物抗原免疫反应失常而导致肠粘膜损伤和破坏。资料显示，IBD发病率逐年增高，已成为严重影响患者生活质量的常见疾病。IBD的传统治疗主要是针对肠道微生物感染和免疫系统的激活，以非特异性抗炎药物和免疫抑制剂为主，并辅以抗菌药物。临床观察发现，上述疗法存在明显的药物毒性反应和全身性副作用，特别是针对顽固性CD的治疗仍缺乏有效的措施，不能改变CD的自然病程。近年来的研究表明，CD的生物是调整各种炎症因子水平的有效方法，但确切疗效及生物安生性尚待关注。新近研究显示，CD发生的机制可能与肠道先天免疫反应缺陷以及中性粒细胞、巨噬细胞功能受损有关；重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-C... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

乳链菌表达系统示意图

将离心管倒置于滤纸上lmin，以去除残留的上清。加入冰预冷的0.lmol几CaelZ150林l悬浮菌体，置于一700C冰箱备用。2.1.3.2基因拼接:参照我们以前的方法l’21，见图1一3。具体步骤如下:(l)将22条hGM一CSF寡核昔酸混合按 200nM的终浓度加入 PCRmix中

1乳链菌表达系统pPus的构建结果 1.1PUS基因拼接产物第2次PCR反应产物经 1.0%的琼脂糖凝胶电泳后，发现有50Obp左右的DNA目的片段，与设计的预期片段相符合。见图1一5。500bP200bP图1一 5PUS基因拼接产物电泳图。 F191一 5ElectroPhoresisofPUS ProductsofPCRassembly M3DNAmarkerladder PUSTheProduetofPUS.图1一6PUSTA克隆产物EeoRI酶切鉴定电泳图。 F191一 6ElectroPhoresisoftheTA eolonyProduetsofPUSafter EcoRIexcision 1DNAmarker3，ZThePositive coloniesofPUS， 3Thenegative eo!oniesofPUS.

【参考文献】：
期刊论文
[1]粒-巨噬细胞集落刺激因子与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体构建[J]. 李先茂,沈丽佳,朱梅刚,李祖国,赵彤.  中国病理生理杂志. 2005(07)
[2]体外拼装凋亡素基因[J]. 陈学清,王亚东,孙勇,段佑才,马高峰.  第一军医大学学报. 2005(02)
[3]重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子活性测定标准品的研制[J]. 赵阳,饶春明,张翊,郭莹,丁有学,王军志.  中国肿瘤生物治疗杂志. 2001(03)
[4]三硝基苯磺酸结肠炎动物模型的建立[J]. 王皓,欧阳钦,胡仁伟.  胃肠病学. 2001(01)
[5]用NSF─60细胞MTT比色法检测重组人粒系集落刺激因子的生物活性[J]. 赵艳华,郭学敏,马平,刘福陆.  中国应用生理学杂志. 1995(03)



本文编号：3610199