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IL-22改善脂多糖诱导的Caco-2单层肠上皮紧密连接损伤

发布时间:2022-02-09 06:32
  目的紧密连接(TJ)屏障功能障碍在炎症性肠病(IBD)中起重要作用。据报道IL-22对IBD有直接的保护作用。研究IL-22对TJ屏障功能的保护作用。方法选择肠上皮Caco-2单层细胞,分为对照组、脂多糖(LPS)组、IL-22组、LPS+IL-22组。采用LPS(100μg/mL)或IL-22(100 ng/mL)处理肠上皮Caco-2单层细胞0、12、24、48 h。Western blot检测IL-22受体IL-22R1和TJ蛋白(ZO-1和Occludin)表达。检测Caco-2单层细胞膜跨膜电阻(TEER)。分析Caco-2单层细胞被LPS、IL-22处理48 h后的细胞膜TEER、TJ蛋白变化和免疫荧光方法观察TJ蛋白在细胞膜的分布。结果LPS可上调Caco-2细胞中IL-22R1的表达。LPS可显著降低Caco-2单层细胞膜TEER(刺激24 h,下降水平接近50%),差异有显著统计学意义(P <0.001)。IL-22组ZO-1、Occludin表达水平高于LPS组、LPS+IL-22组,差异有显著统计学意义(P <0.01)。LPS+IL-22组ZO-1、... 

【文章来源】:生物医学工程与临床. 2020,24(04)

【文章页数】:6 页

【部分图文】:

IL-22改善脂多糖诱导的Caco-2单层肠上皮紧密连接损伤


LPS或IL-22刺激Caco-2单层细胞后IL-22R1表达的电泳图

变化曲线,连接蛋白,分子,时间点


LPS显著降低TEER,刺激24 h,下降水平接近50%;而IL-22并没有改变Caco-2单分子层中TEER。见图2。2.2.2 紧密连接蛋白表达比较

电泳图,时间点,细胞膜,电泳图


Western blot分析显示,LPS可导致TJ蛋白ZO-1和Occludin表达降低(灰度值的比值:ZO-1组0.894、0.677、0.532、0.417,Occludin组0.784、0.502、0.471、0.422);而IL-22对ZO-1和Occludin蛋白表达的影响微弱(灰度值的比值:ZO-1组0.899、0.854、0.893、0.917,Occludin组0.938、0.951、0.996、0.979),即IL-22单独对TJ屏障功能几乎无影响。见图3。2.3 IL-22与脂多糖对上皮细胞的相互作用分析


本文编号:3616527

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