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人胃黏膜抗幽门螺杆菌益生菌的筛选及培养方法研究

发布时间:2022-02-14 22:39
  目的:幽门螺杆菌(Helicobacte pylori,Hp)是一种常见的胃肠道致病菌,与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发病密切相关。随着抗生素耐药率逐渐增加,传统Hp根除治疗方案的效果逐渐下降。益生菌的抗Hp作用得到大量科学研究的证实,但目前益生菌主要来源为肠道、乳制品,且其抗Hp效果并不理想。本研究通过选择性乳酸杆菌分离培养技术及琼脂糖微包埋技术对人体胃黏膜细菌进行分离培养、鉴定,寻找潜在抗Hp益生菌,探讨其益生菌特性及抗Hp作用的潜在机制。方法:采用乳酸杆菌选择性分离培养技术在厌氧条件下对人体胃黏膜细菌进行分离培养、通过菌落形态、革兰氏染色结果、16S rRNA序列分析及进化树构建鉴定菌株。采用酸生存实验,在体外pH2条件下分别培养30min,60min,120min,评估加氏乳杆菌在低pH条件下的生存能力。采用全基因组测序技术,对加氏乳杆菌的基因组一般特性及抗菌肽基因与Hp相关性进行分析。采用琼脂糖微包埋技术在有氧条件下,通过过滤、荧光计数等方法按1:10比例包埋单个细菌,在脑心浸液培养基(Brian Heart Infusion,BHI)培养48h。提... 

【文章来源】:青岛大学山东省

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一章 胃黏膜加氏乳杆菌的幽门螺杆菌抑制作用
    1 材料与方法
        1.1 研究对象
        1.2 实验仪器和设备
        1.3 方法
            1.3.1 加氏乳杆菌菌株分离培养及鉴定
            1.3.2 加氏乳杆菌体外酸生存实验
            1.3.3 加氏乳杆菌基因组测序
            1.3.4 统计学分析
    2 结果
        2.1 加氏乳杆菌菌株分离及鉴定
        2.2 加氏乳杆菌与Hp的相关性
        2.3 加氏乳杆菌的酸耐受特性
        2.4 加氏乳杆菌全基因组分析
    3 讨论
第二章 应用琼脂糖微包埋方法培养胃黏膜菌群
    1 材料与方法
        1.1 研究对象
        1.2 实验仪器和设备
        1.3 方法
            1.3.1 胃黏膜标本过滤
            1.3.2 制备琼脂糖乳化微球包埋细菌
            1.3.3 细菌培养
            1.3.4 细菌鉴定
    2 结果
        2.1 琼脂糖乳化微球包埋细菌
        2.2 细菌鉴定
        2.3 鉴定细菌分类属性分析
    3 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表(附录)
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]Participation of microbiota in the development of gastric cancer[J]. Li-Li Wang,Xin-Juan Yu,Shu-Hui Zhan,Sheng-Jiao Jia,Zi-Bin Tian,Quan-Jiang Dong.  World Journal of Gastroenterology. 2014(17)
[2]Adjuvant probiotics improve the eradication effect of triple therapy for Helicobacter pylori infection[J]. Yi-Qi Du, Tun Su, Jian-Gao Fan, Yu-Xia Lu, Ping Zheng, Xing-Hua Li, Chuan-Yong Guo, Ping Xu, Yan-Fang Gong, Zhao-Shen Li, Department of Gastroenterology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China, Department of Gastroenterology, Xinhua Hospital, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China, Department of Gastroenterology, Tongji Hospital, Tong Ji University, Shanghai 200092, China, Department of Gastroenterology, Shanghai First People’s Hospital, Shanghai 201620, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Eighth People’s Hospital, Shanghai 210035, China , Department of Gastroenterology, Shanghai Tenth People’s Hospital, Shanghai 200072, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Songjiang Centeral Hospital, Shanghai 201100, China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(43)



本文编号:3625396

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