HBcAg对健康人及乙肝病毒携带者外周血单个核细胞刺激产生IFN-α影响的研究

发布时间：2022-02-26 09:23

　　目的:构建表达乙肝病毒核心抗原（HBcAg）的复制缺陷型重组腺病毒载体,将其分别转染健康人及乙肝病毒携带者外周血单个核细胞,观察其刺激产生α干扰素水平并与TLR9的天然配体CpG ODN 2006刺激效果进行比较,以初步探讨乙型肝炎病毒感染免疫识别状态及乙肝病毒感染慢性化机制。方法:扩增乙肝病毒（HBV）C基因片段,亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与5型腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共同电转化大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,经卡那霉素抗性筛选和酶切鉴定筛选出携带（HBV）C区基因的重组腺病毒载体,用脂质体包裹PacⅠ酶切线性化的重组质粒,转染到293T细胞内进行重组腺病毒的包装,获得具有感染能力的重组腺病毒颗Ad-HBc。应用密度梯度离心法从健康人（HBsAg阴性）及乙肝病毒携带者外周静脉血中分离出单个核细胞,分为四组加入干预因素:Ad-HBc组、CpG ODN 2006组、Ad-HBc+CpG ODN 2006组和空白对照组,孵育48小时后采用ELISA检测各组细胞培养上清中IFN-α水平。结果:在健康人中,与空白对照组比较,Ad-HBc+CpG ODN 2006组... 

【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料和方法
    2.1 研究对象及筛选标准
    2.2 实验材料
    2.3 实验方法
    2.4 接种
    2.5 ELISA 测定培养上清中 IFN-α的含量
    2.6 数据与统计学处理
第3章 结果
    3.1 Ad-HBc 对 HEK 293T 细胞的转染
    3.2 Ad-HBc 对健康人及乙肝病毒携带者外周血单个核细胞的转染
    3.3 ELISA 测定培养上清中 IFN-α的含量
第4章 讨论
第5章 结论与展望
致谢
参考文献
综述


【参考文献】：
期刊论文
[1]携带乙肝核心抗原基因复制缺陷型重组腺病毒的高效制备和表达[J]. 黄呈辉,欧阳玲,江鹏飞,黄建国.  中国医学工程. 2006(06)
[2]Dysfunction of peripheral blood dendritic cells from patients with chronic hepatitis B virus infection[J]. Fu-Sheng Wang Li-He Xing Ming-Xu Liu Chuan-Lin Zhu Hui-Gang Liu Hui-Fen Wang Zhou-Yun Lei Division of Biological Engineering,~2 Fourth Department of Liver Diseases,Beijing Institute of Infectious Diseases,Beijing Hospital of Infectious Diseases,Beijing 100039,China.  World Journal of Gastroenterology. 2001(04)



本文编号：3644370