调控细胞外信号调节激酶-1对肝星状细胞功能的影响

发布时间：2022-08-23 17:38

　　目的:探讨ERK-1基因静默能否下调HSC ERK-1的表达并影响HSC的生物学活性;以及ERK信号通路、瘦素与HSC生物学功能的关系。方法:①将筛选出的ERK-1 siRNA转染HSC-T6,用MTT法测定细胞增殖变化、RT-PCR法检测Ⅰ以及Ⅲ型胶原mRNA、TIMP-1 mRNA表达、ELISA法测定HSCⅢ型胶原分泌的变化、流式细胞术检测分析细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响。②构建二甲基亚硝胺损伤肝纤维化大鼠模型,RT-PCR检测不同时期纤维化肝脏组织中瘦素mRNA变化;用免疫组化SABC法检测相应的纤维化肝组织中瘦素和Ⅰ、Ⅲ胶原的表达。③瘦素刺激HSC-T6后,Western blot法检测HSC ERK-1/2、pERK（磷酸化ERK）-1/2的变化,ELISA法测定HSC合成Ⅲ型胶原的含量。另外,先进行ERK-1 RNAi然后再加入瘦素刺激HSC-T6,观察ERK-1/2、pERK-1/2表达及HSCⅢ型胶原合成的变化。结果:①189 siRNA对ERK-1表达有较好的抑制效率,稳定性最好,并可持续72 h。②HSC转染ERK基因静默后第4 d始,细胞增殖明显慢于对照组（... 

【文章页数】：2 页


本文编号：3678198