miR-194-5p对LX-2细胞增殖、迁移、活化能力的影响

发布时间：2022-09-27 18:11

　　目的探讨miR-194-5p对LX-2细胞增殖、迁移、活化能力的影响以及可能的分子机制。方法1实验分为TGF-β₁处理组即刺激组,TGF-β₁未处理组即Ctrl组,qRT-PCR实验检测miR-29a-3p、miR-194-5p、miR-22-3p的相对表达水平。2实验分为mimics NC组,miR-194-5p mimics组,inhibitor NC组,miR-194-5p inhibitor组,经脂质体转染LX-2细胞,qRT-PCR检测miR-194-5p的相对表达水平。3 CCK-8实验和细胞集落形成实验检测miR-194-5p对LX-2细胞增殖能力的影响。4划痕实验检测miR-194-5p对LX-2细胞迁移能力的影响。5 qRT-PCR检测miR-194-5p对LX-2细胞中的α-SMA、Collagen I的mRNA相对表达水平的影响。6通过Targetscan、miRanda、miRDB三个生物信息学网络网站筛选预测miR-194-5p的侯选靶基因。7 qRT-PCR检测miR-194-5p对LX-2细胞中wnt5a mRN... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
引言
第1章 实验研究
    1.1 实验细胞、实验仪器和实验试剂
        1.1.1 实验细胞
        1.1.2 实验仪器
        1.1.3 实验试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞复苏、细胞传代以及细胞冻存
        1.2.2 TGF-β1 体外诱导LX-2 细胞活化
        1.2.3 qRT-PCR检测miRNAs的相对表达水平
        1.2.4 qRT-PCR检测miR-194-5p的转染效率
        1.2.5 CCK-8 实验检测miR-194-5p对 LX-2 细胞增殖能力的影响
        1.2.6 集落形成实验检测miR-194-5p对 LX-2 细胞集落形成的影响
        1.2.7 划痕实验检测miR-194-5p对 LX-2 细胞迁移能力的影响
        1.2.8 qRT-PCR检测miR-194-5p对 α-SMA、Collagen I mRNA相对表达水平的影响
        1.2.9 miR-194-5p靶基因的筛选
        1.2.10 qRT-PCR检测mi R-194-5p对 wnt5a mRNA相对表达水平的影响..
        1.2.11 统计分析
    1.3 结果
        1.3.1 TGF-β1 诱导LX-2 细胞的形态学变化
        1.3.2 TGF-β1 诱导的LX-2 细胞中mi RNAs的相对表达水平
        1.3.3 qRT-PCR检测miR-194-5p的转染效率
        1.3.4 miR-194-5p对 LX-2 细胞增殖能力的影响
        1.3.5 miR-194-5p对 LX-2 细胞集落形成能力的影响
        1.3.6 miR-194-5p对 LX-2 细胞迁移能力的影响
        1.3.7 miR-194-5p对 α-SMA和 collagenI mRNA相对表达水平的影响
        1.3.8 miR-194-5p候选靶基因的筛选
        1.3.9 miR-194-5p对 wnt5a mRNA相对表达水平的影响
    1.4 讨论
    参考文献
第2章 综述 miRNA与肝纤维化的研究进展
    2.1 肝纤维化现状
    2.2 HSCs与肝纤维化
    2.3 miRNA简介
    2.4 miRNA与肝纤维化
    2.5 miRNA与肝纤维化信号通路的调节
        2.5.1 miRNA参与Gas6/ Axl途径信号通路
        2.5.2 miRNA参与TGF-β/Smad信号通路
        2.5.3 miRNA参与Wnt信号通路
        2.5.4 其他调节机制
    2.6 讨论
    参考文献
结论
致谢
导师简介
作者简介
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver fibrosis and hepatic stellate cells: Etiology, pathological hallmarks and therapeutic targets[J]. Chong-Yang Zhang,Wei-Gang Yuan,Pei He,Jia-Hui Lei,Chun-Xu Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(48)
[2]Human urokinase-type plasminogen activator gene-modified bone marrow-derived mesenchymal stem cells attenuate liver fibrosis in rats by down-regulating the Wnt signaling pathway[J]. Zhi-Gang Ma,Xiao-Dan Lv,Ling-Ling Zhan,Lan Chen,Qi-Yuan Zou,Ji-Qiao Xiang,Jiao-Li Qin,Wei-Wei Zhang,Zhao-Jing Zeng,Hui Jin,Hai-Xing Jiang,Xiao-Ping Lv.  World Journal of Gastroenterology. 2016(06)
[3]靶向肝星状细胞的基因治疗逆转肝纤维化的研究进展[J]. 谌双君,赵卫华,丛敏.  肝脏. 2016(01)
[4]Mi R-9a-5p regulates proliferation and migration of hepatic stellate cells under pressure through inhibition of Sirt1[J]. Feng Qi,Jiang-Feng Hu,Bao-Hai Liu,Chao-Qun Wu,Hong-Yu Yu,Ding-Kang Yao,Liang Zhu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(34)
[5]mi R-122 negatively correlates with liver fibrosis as detected by histology and FibroScan[J]. Tünde Halász,Gábor Horváth,Gabriella Pár,Klára Werling,András Kiss,Zsuzsa Schaff,Gábor Lendvai.  World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[6]Cellular and molecular mechanisms in the pathogenesis of liver fibrosis:An update[J]. Gülsüm ?zlem Elpek.  World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[7]肝纤维化信号传导通路研究进展[J]. 李刚,龚权.  广东医学. 2014(03)
[8]肝组织中NF-κB、TGF-β1及其Ⅰ型受体mRNA和HSC在肝纤维化中的改变及护肝片对其的影响[J]. 吴义春,吴强,杨雁,杨枫,陈敏珠.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2011(03)
[9]MicroRNA定量检测方法的研究进展[J]. 景花,宋沁馨,周国华.  遗传. 2010(01)



本文编号：3681366