人IFN-γ在表达HBsAg肝细胞中的特异性表达及其体外抑制乙肝病毒的作用

发布时间：2022-09-30 10:06

　　干扰素γ（interferon gamma, IFNγ）在宿主抵抗肝炎病毒的过程中发挥着重要的作用。IFNγ能通过非细胞溶解方式抑制乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染肝细胞中HBV的复制中间体并降解HBV在复制过程中产生的前基因组RNA,从而显著降低了细胞中的病毒水平。IFNγ的这些作用已经在细胞水平和HBV转基因或HBV感染的动物模型中得到证实。然而在临床上如果给HBV患者全身应用重组人IFNγ,为了保证IFNγ在肝细胞中达到有效治疗浓度,就需要较大剂量的应用IFNγ以获得相应的血药浓度,这样就会导致因IFNγ带来的严重全身不良反应而停止治疗的后果。因此,建立一种肝细胞特异性的、可调控的IFNγ表达的基因治疗方法成为最佳解决方案。 我国是乙型肝炎的高发区,我国一般人群的HBV表面抗原（hepatitis B virus surface antigen, HBsAg）携带率高达10%,约占全世界HBsAg携带者人数的1/3以上,其中75-90%的原发性肝癌与此有关。由于整合在人体基因组的HBV基因片段中,以S基因、X基因和增强子I最多,其中S基因启动... 

【文章页数】：138 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 在表达HBsAg肝细胞中特异性表达的人IFN-γ真核表达载体(pcDNA3.1-SCⅡ)的构建
    前言
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
    1.3 实验结果
    1.4 讨论
第二部分 体外实验分析pcDNA3.1-SCⅡ载体中效应基因人IFN-γ的细胞特异性表达
    前言
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
    2.3 实验结果
    2.4 讨论
第三部分 pcDNA3.1-SCⅡ载体体外抑制乙肝病毒复制与表达的研究
    前言
    3.1 实验材料
    3.2 实验方法
    3.3 实验结果
    3.4 讨论
结论
参考文献
综述(一) 乙型肝炎病毒感染的基因治疗研究进展
    参考文献
综述(二) 乙型肝炎病毒感染的非细胞溶解性清除机制研究进展
    参考文献
附录1 博士研究生期间发表的论文和参与的课题
附录2 pcDNA3.1-SCⅡ中各基因片段Nucleotide Sequence Blast结果
附录3 部分质粒测序结果图
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]HBscFv-IFNγ在毕赤酵母X33中的表达、纯化及鉴定[J]. 周世水,王小宁.  生物工程学报. 2008(03)
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博士论文
[1]突变型HBV启动子调控apoptin表达诱导肝癌细胞凋亡的初步研究[D]. 李婧.中国人民解放军军事医学科学院 2007

硕士论文
[1]肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的实验研究[D]. 周慧明.浙江大学 2003



本文编号：3683354