IL-1β及TNF-α促进大鼠肠平滑肌细胞表达胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）并抑制其受体表达

发布时间：2022-10-04 13:36

　　目的研究白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）对SD大鼠肠平滑肌细胞（ISMC）胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）及其受体原癌基因受体酪氨酸激酶（Ret）和GDNF家族受体α1（GFRα1）表达的影响。方法改良酶消化法分离SD大鼠ISMC,免疫细胞化学染色法检测观察平滑肌细胞特异性标志物α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及结蛋白（desmin）的表达;单独或联合使用IL-1β和TNF-α处理ISMC 48 h,用实时定量PCR检测各组GDNF、 Ret及GFRα1 mRNA相对表达水平。结果利用改良酶消化法获得了高纯度的大鼠ISMC,其α-SMA及desmin阳性率均大于95%;与空白对照组相比, TNF-α能促进ISMC表达GDNF,抑制其表达GFRα1,而对Ret的表达无明显影响,IL-1β能抑制ISMC表达Ret,对GDNF及GFRα1的表达无明显影响;IL-1β联合TNF-α能显著促进ISMC表达GDNF,抑制其表达Ret及GFRα1。结论 IL-1β联合TNF-α能促进ISMC表达GDNF,抑制其表达GDNF受体Ret及GFRα1。 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 ISMC的分离、培养
        1.2.2 免疫细胞化学染色法检测培养细胞α-SMA、 desmin、 GFAP、 CD90的表达以鉴定ISMC
        1.2.3 实时定量PCR检测IL-1β、 TNF-α处理后, ISMC的GDNF、 Ret、 GFRα1mRNA水平
        1.2.4 统计学分析
2 结果
    2.1 ISMC为扁平状呈明显“谷-峰”样生长
    2.2 分离的细胞表达α-SMA及desmin, 不表达GFAP及CD90, 鉴定为ISMC
    2.3 IL-1β联合TNF-α可以促进ISMC表达GDNF, 抑制ISMC表达GFRα1和Ret
3 讨论



本文编号：3685127