雷帕霉素对TNBS诱导小鼠炎症性肠病的治疗作用及机制研究

发布时间：2022-10-11 11:43

　　炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease，IBD）是一类非特异性肠道慢性炎症疾病的统称，主要分为克罗恩疾病（Crohn’s Disease，CD）和溃疡性结肠炎（UlcerativeColitis，UC）两种，可导致患者腹泻、腹痛，甚至有诱发结肠癌的风险。免疫因素在该类疾病发病机制中占有重要地位，与T细胞免疫应答过激反应相关，出现免疫稳态失衡和CD4+T细胞亚群功能紊乱被认为是引起炎症性肠病的重要因素。本课题以TNBS诱导的小鼠IBD为模型，研究新型免疫抑制剂雷帕霉素的治疗作用，并探讨其相关的免疫学机制，为临床炎症性肠病的防治提供新的思路和方向。 研究目的： 观察免疫抑制剂雷帕霉素对TNBS诱导IBD的治疗效果，探讨其可能存在的免疫学机制；并采用替代活化巨噬细胞（AAM）过继治疗，检测其在IBD中的作用及相关机制，为临床IBD治疗新途径提供理论和实验依据。 研究方法： 建立TNBS诱导的小鼠IBD为模型，观察免疫抑制剂雷帕霉素的治疗作用。依据组织病理学检查判断雷帕霉素治疗效果，流式细胞术测定脾脏和肠系膜淋巴结中T细胞亚群变化，RT-PCR... 

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 序言
第二章 雷帕霉素对炎症性肠病的治疗效果
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 主要实验材料
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器设备
        2.2.4 主要溶液配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 TNBS 诱导的 IBD 模型建立
        2.3.2 RAPA 给药治疗 IBD
        2.3.3 肠组织 H&E 染色
        2.3.4 结肠炎严重程度评估
    2.4 实验结果
        2.4.1 体重变化结果
        2.4.2 TNBS 肠炎 DAI 评分
        2.4.3 组织学观察与病理评分
    2.5 讨论
第三章 雷帕霉素诱导的调节性 T 细胞的在治疗中的作用
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 主要实验材料
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器设备
        3.2.4 主要溶液配制
    3.3 实验方法
        3.3.1 模型建立
        3.3.2 流式细胞术检测 Treg、Th1、Th2 和 Th17 细胞
        3.3.3 PCR 检测各种细胞因子表达
    3.4 实验结果
        3.4.1 RAPA 对小鼠 Treg、Th1、Th2 和 Th17 细胞群数量的影响
        3.4.2 RAPA 对细胞因子基因表达谱的影响
    3.5 讨论
第四章 雷帕霉素诱导替代活化巨噬细胞(AAM)的研究
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 主要实验材料
        4.2.2 主要试剂
        4.2.3 主要仪器设备
        4.2.4 主要溶液配制
    4.3 实验方法
        4.3.1 腹腔巨噬细胞的分离
        4.3.2 RAPA 体内诱导 AAM
        4.3.3 RAPA 体外诱导 AAM
        4.3.4 流式细胞术检测 AAM 细胞
        4.3.5 体外培养巨噬细胞 RNA 的提取
        4.3.6 PCR 检测各种细胞因子表达
    4.4 实验结果
        4.4.1 雷帕霉素体内诱导 AAM 的生成
        4.4.2 雷帕霉素体外诱导 AAM 的生成
    4.5 讨论
第五章 替代活化巨噬细胞（AAM）在 IBD 治疗中的作用
    5.1 前言
    5.2 实验材料
        5.2.1 主要实验材料
        5.2.2 主要试剂
        5.2.3 主要仪器设备
        5.2.4 主要溶液配制
    5.3 实验方法
        5.3.1. TNBS 诱导的 IBD 模型建立
        5.3.2. RAPA 体内诱导 AAM
        5.3.3. 腹腔巨噬细胞的分离
        5.3.4. AAM 过继治疗
        5.3.5. 肠组织 H&E 染色
        5.3.6. 结肠炎严重程度评估
        5.3.7. 流式细胞术检测 Treg、Th1、Th2 和 Th17 细胞
        5.3.8. PCR 检测各种细胞因子表达
    5.4 实验结果
        5.4.1 体重变化结果
        5.4.2 TNBS 肠炎 DAI 评分
        5.4.3 组织学观察评分
        5.4.4 T 淋巴细胞亚群流式测定
        5.4.5 肠组织各炎性因子基因表达结果
    5.5 讨论
全文总结
参考文献
附录 1 英文缩写语中文对照
附录 2 攻读学位期间发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]我国炎症性肠病研究的概况和策略[J]. 欧阳钦.  四川医学. 2005(04)



本文编号：3690511