骨形态发生蛋白9（BMP9）在小鼠酒精性肝病中的作用及机制

发布时间：2022-10-17 15:27

　　背景/目的酒精滥用可引发酒精性肝病（Alcoholic liver disease,ALD）,近年来,由于ALD的发生率和死亡率持续不断的增加,给中国和全世界的国家都造成了很大的经济负担,但是即使经过研究人员多年的实验研究,目前我们对ALD的发病机制仍旧不是很清楚。骨形态发生蛋白9（Bone Morphogenetic Protein 9,BMP9）是TGFβ超级家族的成员之一,主要是由肝脏星状细胞产生的,与多种肝脏疾病密切相关,例如BMP9可抑制肝再生,促进肝纤维化和肝癌等。但是由于人们对于BMP9在ALD发生发展过程的作用却仍不清楚,于是本课题通过基因敲除技术全身性敲除小鼠的BMP9基因,以探究BMP9在ALD发生发展过程中作用。方法1. 本课题组利用C57BL/6J野生型（Wild type,WT）小鼠构建全身性BMP9基因敲除(BMP9^-/-)小鼠;2.利用构建好的BMP9^-/-和WT小鼠,通过分别给予小鼠10天的对照或酒精液体饲料喂养和一次麦芽糖或酒精灌胃建立慢性+酒精灌胃模型（ALD模型,Gao-Binge模型）;3.通过检测两组... 

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【学位级别】：硕士

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Abstract
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验动物
    2.2 实验试剂与耗材
    2.3 实验仪器与设备
    2.4 主要的试剂配置
    2.5 实验方法
        2.5.1 酒精性肝病的造模以及取材
        2.5.2 小鼠基因组提取及基因型鉴定
        2.5.3 H&E染色
        2.5.4 油红染色
        2.5.5 小鼠肝组织甘油三酯含量检测
        2.5.6 免疫组化
        2.5.7 细胞冻存
        2.5.8 细胞复苏
        2.5.9 细胞培养
        2.5.10 总RNA提取
        2.5.11 实时荧光定量PCR
        2.5.12 细胞蛋白提取
        2.5.13 蛋白定量
        2.5.14 蛋白质免疫印迹
        2.5.15 统计学分析
3 实验结果
    3.1 ALD模型中肝脏BMP9 的表达上调
    3.2 敲除BMP9 可以减少ALD模型中小鼠的ALT和AST水平
    3.3 BMP9 缺失可缓解ALD模型小鼠的肝脏损伤程度
    3.4 BMP9 缺失可缓解ALD模型小鼠的肝脏脂肪变性程度
    3.5 BMP9 缺失可减少ALD模型小鼠的肝脏中性粒细胞浸润程度
    3.6 BMP9 缺失可减少ALD模型小鼠的肝脏巨噬细胞浸润与炎症水平
    3.7 BMP9敲除后可降低酒精诱导肝脏氧化应激程度
    3.8 BMP9 可以增加肝脏TLR4的表达
    3.9 BMP9 可以增加巨噬细胞TLR4的表达
    3.10 BMP9在酒精性肝病中的作用的总结示意图
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述 酒精性肝病的研究现状
    参考文献



本文编号：3692327