幽门螺杆菌对GES-1细胞PI3K/AKT通路、P21 WAF1 和Bax的影响和意义

发布时间：2022-12-11 02:22

　　研究目的: 通过不同基因型的幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori,H.pylori）培养上清作用人胃黏膜上皮细胞（GES-1）,研究细胞形态、凋亡和增殖及P21WAF1、Bax、PTEN、PI3K、p-Akt表达的变化,从而在体外探讨H. pylori对胃黏膜上皮细胞的影响及其机制,为H.pylori相关疾病的分子治疗提供新的靶点和方向。 研究方法: 根据预实验结果,分组如下:（1）不同浓度NCTC11637 H.pylori上清液的实验组,浓度分别为A组（1.3875mg/ml）,B组（2.775mg/ml）,C组（5.55mg/ml）;（2）不同浓度NCTC11639H.pylori上清液的实验组,浓度分别为A（1.875mg/ml）,B（3.75mg/ml）,C（7.5mg/ml）;（3）阴性对照组（H.pylori培养液）。各组作用GES-1细胞时间均为24h、48h、72h,用倒置显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态;用四唑蓝（MTT）比色试验检测细胞生长的抑制率;用RT-PCR检测mRNA的表达;用免疫细胞化学检测蛋白的表达。 ... 

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞株和菌株
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要试剂配制
    2.2 方法
        2.2.1 GES-1 细胞培养
        2.2.2 H.pylori 培养及 H.pylori 培养上清液的制备
        2.2.3 不同基因型 H.pylori 培养上清液作用 GES-1 细胞
        2.2.4 MTT 法检测细胞生长的抑制率
        2.2.5 透射电镜观察细胞的形态
        2.2.6 RT-PCR 检测 PTEN、Bax、P21~(WAF1)m RNA
        2.2.7 免疫细胞化学检测 PTEN、PI3K、p-AKT、Bax 蛋白(PV-9000 二步法 免疫组化检测试剂)
        2.2.8 统计学处理
第3章 结果
    3.1 不同基因型 H.pylori 培养上清液对 GES-1 细胞形态的影响
    3.2 不同基因型 H.pylori 培养上清液对 GES-1 细胞增殖的影响
    3.3 不同基因型H.pylori 培养上清液对PTEN、Bax 及P21~(WAF1)mRNA 表达的影响
    3.4 不同基因型 H.pylori 培养上清液对 PTEN、PI3K、磷酸化 Akt、 Bax 蛋白表达的影响
第4章 讨论
    4.1 不同基因型 H.pylori 培养上清液对 GES-1 细胞增殖及凋亡的影响
    4.2 不同基因型 H.pylori 培养上清液对 GES-1 细胞内 P21~(WAF1) 的影响
    4.3 不同基因型 H.pylori 培养上清对 GES-1 细胞内 Bax 的影响
    4.4 不同基因型 H.pylori 培养上清对 GES-1 细胞内 PI3K/Akt 信号通 路的影响
第5章 结论
致谢
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3717960