高表达的CYP2E1在脂肪酸酒精协同刺激下可调控枯否细胞的NF-κB通路，增加炎性因子的分泌

发布时间：2023-02-08 20:08

　　目的:探讨CYP2E1在脂肪酸酒精协同刺激下对炎性因子表达及信号通路的影响及意义.方法:1、慢病毒转染构建CYP2E1稳定高表达的巨噬细胞系(Raw264.7细胞),此细胞系记为RE1组,用未转染的普通巨噬细胞系作为参照,记为Raw组。2、使用脂肪酸及乙醇刺激细胞,建立酒精脂肪酸协同增效的炎性模型;同时在这两个细胞系中分别设立四个组:(1)空白对照组(C组)(2)酒精组(50mM,A组)(3)脂肪酸组(0.5mM,F组)(4)酒精+脂肪酸组(浓度同前,AF组)。3、使用油红O染色检测细胞经酒精及脂肪酸刺激后的脂肪变情况;4、使用Real-time PCR检测细胞中TNF-α的表达;5、使用western blot检测细胞中NF-κB、MAPK、STAT3的磷酸化蛋白来明确炎性相关的信号通路的表达;6、将模型中各组的上清与正常肝细胞进行共培养4小时后,检测上清中的转氨酶变化,用油红O染色鉴定肝细胞中的中性脂滴累积情况。结果:利用慢病毒技术建立稳定高表达CYP2E1的raw细胞系。经Real-time PCR和western blot证实过表达组较对照组CYP2E1mrna水平升高46倍(...

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综述：非酒精性脂肪性肝病相关信号通路的研究进展
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