白细胞介素13对胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路表达的影响及地塞米松的干预作用

发布时间：2023-02-09 19:34

　　目的:探讨白细胞介素13(IL-13)对胆管成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路活性的影响及地塞米松(Dex)的干预作用。方法:分离、培养兔胆管成纤维细胞并鉴定后分别给予IL-13、IL-13联合不同浓度的Dex(0.01、0.05、0.25 mg/mL)干预48 h,以无处理的胆管成纤维细胞为空白对照,分别用CCK-8细胞计数法测定各组细胞增殖水平;real-time PCR检测各组细胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因mRNA表达;Western blot检测各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达。结果:与空白对照组比较,在IL-13干预48 h后,胆管成纤维细胞增殖明显加速、TGF-β1、Smad3及Smad4 mRNA表达均明显上调,TGF-β1、Smad4蛋白表达明显上调(均P<0.05),而Dex对IL-13引起的上述变化有明显的抑制作用,并呈一定的浓度依赖趋势(部分P<0.05)。结论:IL-13能增加胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路的活性,削弱该通路的活化可能是Dex抑制良性胆道狭窄形成的机制之一。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 动物模型的建立、细胞的获取及细胞鉴定
    1.3 实验分组及各组细胞的处理
    1.4 观察指标及测定方法
        1.4.1 细胞免疫荧光法鉴定成纤维细胞
        1.4.2 CCK-8法测定成纤维细胞增殖水平
        1.4.3 real-time PCR测定各组细胞中TGF-β1、Smad3及Smad4 m RNA的表达
        1.4.4 Western blot检测组细胞中TGF-β1及Smad4蛋白表达
    1.5 统计学处理
2 结果
    2.1 成纤维细胞的鉴定
    2.2 各组细胞增殖水平的测定
    2.3 各组细胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因m RNA表达水平
    2.4 各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达水平的测定
3 讨论



本文编号：3739125