CMA降解Plin5参与NAFLD脂解异常的研究

发布时间：2023-03-02 18:35

　　【背景】非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)以肝脏内甘油三酯(Triglyceride,TG)含量增加为主,可以进展为肝炎、肝纤维化、肝硬化甚至肝癌。在美国非酒精性脂肪性肝炎是导致肝硬化的一个很重要的原因,其相关的肝硬化也已经成为目前肝移植的第二大指征。在我国NAFLD发病率逐年升高,且呈现出年轻化趋势。NAFLD患者主要表现出肝脏中TG、胆固醇等脂类以脂滴的形式大量堆积而导致的脂肪变性,同时伴或不伴有外周血中TG、胆固醇等升高。脂肪变性的主要原因是肝细胞脂肪酸的摄取和TG的合成增加,TG分解和脂肪酸输出、氧化减少。因此,以脂滴形式储存的TG、胆固醇等脂质的分解障碍在NAFLD疾病发生发展过程中扮演重要角色。传统的脂滴分解主要指脂酶的脂解作用。而近年来自噬在脂解中的作用已被越来越多的研究证实。2009年自噬与脂滴脂解之间的联系首次被证实,研究发现,无论是在体内还是体外试验中,抑制自噬能够增加细胞内TG和脂滴的含量,自噬功能的丧失能够减少TG的分解。自噬主要包括大自噬、分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated...

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【学位级别】：硕士

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文献回顾
第一部分 Lamp2a与Plin5在脂肪性肝病中的表达存在负相关
    1 材料
        1.1 苏木素-伊红染色相关试剂
        1.2 蛋白定量、Western-blot相关的试剂
        1.3 免疫组化相关试剂
        1.4 实验动物
        1.5 标本来源
        1.6 主要仪器
    2 方法
        2.1 苏木素-伊红染色(H&E染色)
        2.2 组织蛋白提取
        2.3 Western-blot
        2.4 免疫组织化学
    3 结果
    4 讨论
第二部分 Lamp2a影响Plin5的降解及脂滴的分解
    1 材料
        1.1 蛋白定量、Western-blot相关的试剂
        1.2 免疫组化相关的试剂
        1.3 细胞培养相关试剂
        1.4 细胞培养相关材料
        1.5 细胞株
        1.6 主要仪器
    2 方法
        2.1 蛋白定量、Western-blot
        2.2 免疫组织化学
        2.3 细胞培养
        2.4 细胞蛋白提取
        2.5 蛋白浓度测定
        2.6 油酸的配制
        2.7 Bodipy荧光染色
    3 结果
    4 讨论
第三部分 Plin5通过CMA途径降解
    1 材料
        1.1 蛋白定量、Western-blot相关试剂
        1.2 细胞培养相关试剂
        1.3 qRT-PCR相关试剂
        1.4 免疫共沉淀(Co-IP)相关试剂
        1.5 主要仪器
    2 方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞蛋白提取
        2.3 细胞蛋白浓度测定
        2.4 Western-blot
        2.5 Trizol法提取细胞 RNA
        2.6 RNA浓度测定
        2.7 反转录
        2.8 qRT-PCR
        2.9 免疫共沉淀(Co-IP)
    3 结果
    4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢



本文编号：3752418