TGF-β 1 siRNA对肝星状细胞生物学活性影响的实验研究

发布时间：2023-03-03 22:25

　　目的 肝纤维化是各种肝损伤的共同结果，肝星状细胞(HSC)是肝纤维化形成的细胞基础，许多细胞因子参与了肝纤维化和肝硬化的形成，，分子机理表明，在许多细胞因子参与中，转化生长因子β1(TGF-β1)在HSC的激活、细胞外基质的聚积起着非常关键的作用，RNA干扰(RNAi)是一种能达到特异性抑制目的基因表达的现象，已成功地下调了一些内源性基因的表达。我们目的是通过构建表达TGF-β1小干扰RNA(siRNAs)的psu6TGF质粒，观察其在肝星状细胞中对HSC的信号激活和胶原的影响。 方法 (1)从NCBI网站获得大鼠TGF-B1的cDNA序列，根据Ambion公司网上设计软件设计三个siRNA作用靶点，相应的双链DNA被插入pSilencer2.1-U6质粒中，即，siTGFA、siTGFB、 siTGFC；(2)以脂质体Metafectene2000转染含荧光素基因(GFP)的质粒于HSC-T6细胞中，观察转染效率：(3)为了得到高效沉默TGF-β1siRNA，利用脂质体Metafectene2000将各组siRNA 1ug，2ug，4ug，6ug，8ug转染HSC-T6细胞...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
一、中文摘要
二、英文摘要
三、英汉缩略语名词对照表
四、论文正文
    前言
    第一章 抗转化生长因子-β₁小干扰RNA表达质粒的建立
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
    第二章 高效沉默转化生长因子-β₁小干扰RNA表达质粒的筛选
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
    第三章 TGF-β₁小干扰RNA表达质粒对肝星状细胞活化和细胞外基质的影响
        3.1 材料与方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
    结论
    参考文献
五、综述
    综述一：TGF-β₁与肝纤维化
    综述二：RNAi的研究进展
六、攻读学位期间发表的文章
七、致谢



本文编号：3753224