多重媒介探针熔解曲线分析技术在胃肠道病原体诊断中的应用研究

发布时间：2023-05-11 00:17

　　感染性腹泻(infectious diarrhea)是指由细菌、病毒、真菌以及寄生虫而引起的腹泻。由于腹泻病人的临床症状极为相似,难以根据症状鉴定出导致腹泻的病原体,使得临床医生无法拟定针对性的治疗方案。目前已经报道的文献中少有同时检测细菌和病毒的相关研究。本论文采用媒介探针结合熔解曲线分析技术,建立了一管检测12种细菌、6种病毒以及一种血清型的快速分析方法。在第一章中,第一节介绍了感染性腹泻的背景、临床表现、发病机制以及抗菌药物的治疗;第二节介绍了检测胃肠道病原体常用诊断技术;第三节介绍了多重媒介探针结合熔解曲线分析技术的原理以及胃肠道病原体靶标基因的选择。第二章为材料与方法部分包括所用的仪器与试剂、质粒的构建、引物及探针的设计、单重及多重体系的建立、灵敏度考察、特异性考察、重复性考察、混合感染识别能力考察以及临床评价。第三章介绍了本体系的性能考察以及标本的检测结果。本论文以细菌和病毒为检测对象,建立了一管5色29重体系。检测的灵敏度可以达到50拷贝/反应,部分对象可达5拷贝/反应。体系的重复性好,熔点的CV值最大为0.78%,其他均小于0.5%。本体系检测了深圳疾病预防控制中心收集...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    第一节 感染性腹泻和胃肠道病原体
        1.1 感染性腹泻概述
        1.2 感染性腹泻临床表现
        1.3 感染性腹泻发病机制
        1.4 感染性腹泻抗菌药物治疗
    第二节 胃肠道病原体常用诊断技术
        2.1 分离培养法
        2.2 电镜法
        2.3 免疫学检测技术
        2.4 TOF MS技术
        2.5 PCR检测技术
    第三节 本论文的研究目的和内容
        3.1 多重媒介探针熔解曲线分析技术原理
        3.2 胃肠道病原体靶标基因的选择
第二章 材料与方法
    第一节 仪器与试剂
        1.1 仪器
        1.2 试剂
    第二节 多重媒介探针熔解曲线技术在胃肠道病原体诊断中的体系建立
        2.1 质粒标准品的构建
        2.2 引物和探针设计
        2.3 单重检测体系的建立
        2.4 多重检测体系的建立
        2.5 分析灵敏度考察
        2.6 特异性考察
        2.7 重复性考察
        2.8 混合感染识别能力考察
        2.9 临床评价
第三章 结果与分析
    第一节 一管五色检测体系的设计
    第二节 单重检测体系的建立
    第三节 多重检测体系的建立
    第四节 多重媒介探针熔解曲线技术在胃肠道病原体诊断中的性能考察
        4.1 分析灵敏度考察
        4.2 特异性考察
        4.3 重复性考察
        4.4 混合感染识别能力考察
        4.5 临床标本评价
        4.6 讨论
参考文献
附表
英文缩写索引
致谢



本文编号：3813776