TGF-β1通过ERK1/2信号通路促进人肝星状细胞LX-2中HMGA1基因表达

发布时间：2023-06-02 04:03

　　目的:明确TGF-β1是否诱导了人肝星状细胞LX-2中HMGA1基因的表达,是否活化ERK1/2和Akt信号通路,TGF-β1是否通过ERK1/2和(或)Akt通路促进HMGA1基因的表达。方法:1、以体外培养的LX-2作为研究对象,经血清饥饿处理后,加入终浓度分别为0ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的TGF-β1孵育,24小时后收集细胞,提取LX-2细胞的总RNA,用Realtime-qPCR法检测各组细胞中HMGA1和HMGA2的mRNA表达情况。2、以5ng/ml的TGF-β1及ERK1/2和Akt通路抑制剂(分别为PD98059和MK2206)处理LX-2细胞,设正常对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+DMSO阴性对照组、TGF-β1+PD98059(MK2206)处理组,采用western blot检测各组细胞中pERK1/2、pAkt、ERK1/2、Akt的蛋白表达情况。3、用5ng/ml的TGF-β1及PD98059和MK2206处理LX-2细胞,设正常对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+DMSO阴性对照组、TGF-β1+MK2206处理...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 主要试剂和材料
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 主要试剂的配制方法
        2.2.2 人肝星状细胞株LX-2 的培育
        2.2.3 TGF-β1 浓度梯度对HMGA1及HMGA2表达的影响
        2.2.4 TGF-β1 对ERK1/2 和Akt通路的活化作用
        2.2.5 TGF-β1 通过ERK1/2 通路促进HMGA1的表达
        2.2.6 Realtime-qPCR检测
        2.2.7 WesternBlot检测
        2.2.8 统计学方法
第3章 结果
    3.1 TGF-β1 对LX-2 细胞中HMGA1和HMGA2的mRNA表达的影响
    3.2 TGF-β1 对LX-2 细胞中p-ERK1/2 和p-Akt信号通路的活化作用
    3.3 TGF-β1 通过ERK1/2 信号通路促进了HMGA1基因的表达
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3827625