circ 0 000038调控miR-323-3p对肝纤维化小鼠肝脏炎症反应的抑制作用和机制研究

发布时间：2023-10-22 12:43

　　肝纤维化是一种慢性和持续性肝损伤,与炎症反应的病理状态有关,巨噬细胞是肝纤维化中炎症的主要诱因。肝脏巨噬细胞通过释放不同促炎症因子作用于肝星状细胞,调节肝纤维化的发生发展。环状RNA(circ RNA)是一类广泛存在于多种真核生物体内,具有闭合环状结构的非编码RNA分子。研究发现circ RNA可以充当miRNA的海绵,在多种病理学和生物学过程中调节基因表达。但是,circ RNA在CCl₄诱导的肝纤维化中的表达谱仍有待研究。在这项研究中,课题组通过高通量测序揭示了肝纤维化中原代肝脏巨噬细胞中差异表达的circ RNA,选择20个下调的circ RNA进行real-time PCR验证。在CCl₄诱导的肝纤维化小鼠和LPS刺激的RAW264.7细胞中,circ＿0000038的表达都显著降低,提示我们其可能参与肝纤维化过程。分别在小鼠体内和体外RAW264.7细胞中转染circ＿0000038过表达慢病毒,通过western blot、real-time PCR、ELISA等实验对circ＿0000038参与肝纤维化进程进行探究。实验结果显示...

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料
    2.1 实验动物和实验细胞
    2.2 主要试剂
    2.3 仪器与设备
    2.4 主要溶液的配制
3 实验方法
    3.1 构建 CCl₄诱导的肝纤维化模型
    3.2 灌流小鼠原代肝脏巨噬细胞
    3.3 肝组织病理学检测
    3.4 ALT和 AST检测
    3.5 RAW264.7细胞培养和活化
    3.6 RNA荧光原位杂交(FISH)
    3.7 慢病毒的感染
    3.8 酶联免疫吸附法(ELISA)
    3.9 Western blot
    3.10 Real-time PCR
    3.11 统计学分析
4 实验结果
    4.1 circRNAs 在 CCl₄诱导的肝纤维化小鼠中表达谱分析
    4.2 circ₀000038在LPS诱导的RAW264.7 细胞的表达变化
    4.3 circ₀000038过表达减轻肝纤维化小鼠的炎症反应
    4.4 RAW264.7 细胞中过表达circ₀000038 对细胞炎症反应的调节作用
    4.5 circ₀000038 通过靶向miR-323-3p抑制炎症反应
    4.6 circ₀000038 靶向miR-323-3p通过JAK2/STAT1 信号通路抑制炎症反应
5 讨论
6 结论
7 参考文献
附录
致谢
综述 circRNA 在肝脏疾病中的研究进展
    参考文献



本文编号：3856542