过表达miR-31对结肠炎模型小鼠TLR4/NF-κB信号通路及凋亡蛋白的调控

发布时间：2023-10-28 20:38

　　目的:探讨miR-31对DSS诱发结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路和凋亡相关蛋白的影响。方法:①小鼠结肠炎实验:用1%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱发小鼠溃疡性结肠炎(UC)。14只FVB非转基因小鼠随机分为control组(n=6),DSS组(n=8),16只FVB miR-31转基因小鼠随机分为miR-31过表达组(n=8),miR-31过表达+DSS组(n=8),DSS溶于水后通过饮水给予小鼠。DSS组和miR-31+DSS组第一周饮用1%DSS水,第二周饮用正常无菌水,第三周饮用1%DSS水,如此5周后造模完成,之后留取小鼠的结肠组织,通过Western blot和IHC检测小鼠结肠组织NF-κB p65、TLR4、Bax、Bcl-2蛋白的表达; TUNEL检测小鼠结肠组织细胞凋亡。②细胞培养实验:在人结肠上皮细胞系HCT 116细胞中通过脂质体转染的方法转染miR-31 mimic和inhibitor,使miR-31过表达或敲低,每组均进行三次重复,48 h后收取细胞,通过Western blot检测NF-κB p65、TLR4蛋白的表达。结果:①动物实验中,与control...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物与试剂
    1.2 小鼠DSS诱导结肠炎模型的建立
    1.3 细胞培养和转染
    1.4 Western blot检测NF-κB p65、TLR4、Bax、Bcl-2蛋白的表达
    1.5 免疫组织化学(IHC)法检测NF-κB p65、TLR4、Bax、Bcl-2蛋白的表达
    1.6 原位末端转移酶(TUNEL)法检测小鼠结肠组织细胞凋亡
    1.7 统计学处理
2 结果
    2.1 Western blot检测miR-31对小鼠结肠组织中NF-κB和TLR4蛋白表达的影响
    2.2 免疫组织化学法(IHC)检测miR-31对小鼠结肠组织中NF-κB和TLR4蛋白表达的影响
    2.3 Western blot检测miR-31对小鼠结肠组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响
    2.4 免疫组织化学法(IHC)检测miR-31对小鼠结肠组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响
    2.5 TUNEL法检测miR-31对小鼠结肠组织细胞凋亡的影响
    2.6 miR-31对HCT 116细胞中NF-κB、TLR4蛋白表达的影响
3 讨论



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