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外源性Smad-7联合TIMP-lsiRNA对大鼠肝纤维化干预治疗的实验研究

发布时间:2023-11-08 20:10
  目的: 本研究复制肝纤维化大鼠模型,通过腹腔注射经脂质体包埋的重组Smad-7与TIMP-1siRNA真核细胞表达质粒,对肝纤维化大鼠进行干预治疗,分析两种质粒及联合作用对大鼠肝纤维化的影响。 材料和方法: 1.四氯化碳复合因素法建立肝纤维化大鼠模型:40%四氯化碳棉籽油溶液给大鼠皮下注射,0.3 mL/100 g体重(首次剂量0.5 mL/100 g),后每隔4天注射一次,每次3ml/kg,共注射12次,20%乙醇溶液作为唯一饮用液体,并给予高脂高胆固醇饲料。设立正常对照组大鼠,同期皮下注射生理盐水,剂量同实验组,采用标准饲养方法。 2.重组质粒的导入:各干预组及对照组采用脂质体包埋法分别将Smad-7/pcDNA3.1 (+)、TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)重组质粒及pcDNA3.1(+)质粒各100μtg导入大鼠肝纤维化模型。S组采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)质粒;T组采用TIMP-1 SiRNA/pcDN A3.1 (+)质粒;S+T组采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)+TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)质粒;空质粒对照组给予pc...

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

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中英文缩略表
前言
第一部分 动物模型的制备及外源基因的导入
    材料与方法
        1材料与试剂
        2主要实验仪器
        3方法
    结果
第二部分 Smad-7与TIMP-1siRNA表达质粒联合作用对大鼠肝纤维化的影响
    一、免疫组化法检测各实验组动物肝组织中Ⅲ型胶原蛋白的表达
        材料与方法
        结果
    二、RT-PCR检测各实验动物肝组织中Smad-2 mRNA、TIMP-1 mRNA的表达
        材料与方法
        结果
    三、Western blot检测各组各实验动物肝组织中Ⅰ型胶原蛋白的表达
        材料与方法
        结果
讨论
结论与展望
参考文献
文献综述
    参考文献
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