力学因素对肝细胞糖原代谢的影响

发布时间：2024-02-20 00:51

　　【背景与目的】门脉高压症是肝硬化的常见临床症状之一,常见阻塞原因主要为肝窦和窦后阻塞,假小叶的形成使得原有血液循环通路受阻或改道,压迫血管,限制血液流量。另外,肝窦和窦后阻塞使得淋巴循环受阻,与血液交换减少,进一步造成压力增高。这一过程与肝脏的力学微环境密切相关,但其中的力学生物学机制仍不明确。与此同时,肝脏是参与糖代谢的重要脏器,在维持血糖稳定中具有重要作用。终末期肝病合并门脉高压患者中,肝脏对糖的代谢功能出现障碍,引起血糖紊乱,虽然针对肝糖代谢紊乱的研究有很多,针对细胞外压力对于肝糖原代谢的作用描述及作用机制研究较为少见。因此,在本研究中,我们通过改造细胞孵化装置给予肝细胞施加细胞外压力,从而模拟肝硬化门脉高压中力学微环境,探索不同细胞外压力条件下肝细胞糖代谢的改变模式,从而初步研究细胞外机械压力在肝细胞糖代谢中的调控机制。本研究分为以下三个部分:(1)探讨细胞外压力对于肝细胞糖代谢的影响;(2)验证细胞外压力变化是否通过影响肝糖原的合成使肝癌细胞中糖原含量减少;(3)初步分析哪些上游信号通路参与细胞外压力对于肝细胞糖代谢的影响。【实验方法】一、不同细胞外压力对于肝细胞内糖原含量的...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1压力加载装置示意图

其中使用硅胶管、气体减压阀连接高压氮气，以此由气体输入口使高压气进入压力容器，气体排出口处使用三通阀连接气体冲阀以及测压计。行压力加载时将经灭菌之后的容器主体放入CO2培养箱内，气体输入口使用灭菌硅胶管以“回”固定在培养箱中，CO2培养箱外面连接高压氮气罐。2、压力加载方法（1....

图2不同压力加载后HepG2细胞PAS染色镜下图像

染色区域面积及染色程度较为类似（见图2）。为进一步明确压力对于肝细胞糖原代谢的影响，我们还使用了HL7702细胞进行同步实验。HL7702细胞PAS染色后的光镜下图像同HepG2细胞镜下图像表现较为相似。在5mmHg压力组中，HL7702细胞染色程度较对照组....

图3不同压力加载后HL7702细胞PAS染色镜下图像

海军军医大学硕士学位论文二、肝细胞糖原含量检测结果分析为了将HepG2细胞和HL7702细胞经过压力加载后的糖原含量进行定量分析，我们利用糖原含量试剂盒处理HepG2细胞和HL7702细胞，并使用酶标分析仪检测。根据检测结果，当细胞外压力从0mmHg逐渐增高至....

图4不同压力加载后HepG2细胞和HL7702糖原含量分析结果（***表示P<0.001）

力学因素对肝细胞糖原代谢的影结果1.很多研究显示Gys1、Gsk3β、Agl、G6pc3、Pygl等均能对肝糖原代产生显著影响，因此在对HepG2细胞进行10mmHg压力加载24小时后，利用real-timePCR方法检测对肝糖原合成有调控作用的上述调控因子的....

本文编号：3903587