质谱法与直接测序法检测HBV P基因耐药突变的比较研究

发布时间：2024-02-21 03:53

　　目的：用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)和PCR产物直接测序法两种方法检测乙型肝炎病毒P基因耐药位点的突变情况,并进行比较分析,进一步证实MALDI-TOF MS是一种快速、早期、准确发现核苷(酸)类药物治疗后耐药位点的检测方法。 方法：1、病例来源：(1)研究组：收集90例服用拉米夫定等核苷(酸)类药物治疗1年以上,HBV-DNA仍大于500copies/ml的慢性乙型病毒性肝炎患者血清,并根据核苷(酸)类药物用药情况分为6个组。(2)对照组：同时收集10名HBsAg阳性时间超过6个月,肝功能正常,HBV-DNA>1×105 copies/ml,始终未予抗病毒治疗的慢性乙型病毒性肝炎患者的血清作为对照组。2、检测方法：(1)采用MALDI-TOF MS检测HBV P基因已知11个变异位点的变异情况；基于SEQUENON公司质谱仪及配套芯片-试剂盒技术,通过TYPE4.0软件分析结果。(2)PCR产物直接测序法采用ABI3730XL测序仪,通过SequenceNavigator软件分析得出序列。 结果：1、两种方法检出结果比较：在服用拉米夫定等核苷(...

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第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 病例收集
    2.2 主要试剂及仪器
    2.3 血清存放
    2.4 MALDI-TOF MS
    2.5 PCR产物直接测序法
    2.6 统计学分析
第三章 结果
    3.1 100例病例MALDI-TOF MS及PCR产物直接测序法检测结果
        3.1.1 90例服用核苷(酸)类药物的病例MALDI-TOF MS检测结果
        3.1.2 90例服用核苷(酸)类药物的病例PCR产物直接测序法检测结果
        3.1.3 10例未服用核苷(酸)类药物的病例检测结果
    3.2 两种检测方法检测结果的比较分析
        3.2.1 两种方法变异检出数(率)的比较
        3.2.2 两种方法在不同病毒DNA水平检出数(率)的比较
    3.3 MALDI-TOF MS检测准确性的结果分析
        3.3.1 不同药物组变异位点的组合形式
        3.3.2 不同药物组的变异与相应药物变异位点的相符率
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述
致谢



本文编号：3904995