人足月胎盘羊膜细胞的生物学特性及其治疗肝纤维化的实验研究

发布时间：2024-03-04 17:38

　　利用干细胞强大的增殖能力和分化能力来修复受损组织、重建组织结构、恢复脏器功能一直是干细胞研究关注点之一。近年来研究发现羊膜来源的细胞具有干细胞的特性,包括羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞两类细胞,都表达一定量的与胚胎干细胞类似的多能性标志,在体外经诱导后具有多向分化能力,这使羊膜来源的细胞成为最有应用潜能的干细胞之一。此外,羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞有其自身独特的优势,如较低的免疫原性和抗炎作用;属于产后废弃物,在获取上避免了胚胎干细胞研究的伦理学争执;来源丰富;在细胞的制备方面相对安全、简单。鉴于此,羊膜来源细胞的研究越来越受到重视,成为再生医学和组织工程研究中有价值的种子细胞。在本课题中,我们重点研究这两类细胞的多向分化能力,并通过动物实验探讨其在治疗肝纤维化方面的可行性。 目的: 研究羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞的多向分化能力,并探讨这两种细胞用于治疗肝纤维化疾病的可行性。 方法: 收集剖宫产足月胎盘的羊膜组织,通过多次胰酶消化法获取羊膜上皮细胞,再经胶原酶消化获取羊膜间充质干细胞,应用特定的诱导条件向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肝细胞进行体外诱导分化,通过形态学观察,特殊染...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1不同培养条件下hAECs的相差显微镜观察图片

表13种不同的培养条件下hAECs的贴壁和增殖情况比较Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组原代细胞48h贴壁率20%40%70%首次传代时间（天）753平均传代时间（天）5.5±0.54±0.52.5±0.51.2不同培养条件下羊膜上皮细胞形态比较：各组培养条件下的原....

图1-2hMSC的相差显微镜观察图片

第四军医大学硕士学位论文1.3羊膜间充质干细胞：体外培养的羊膜间充质干细胞存在大、小两种形态（图1-2），经过流式细胞检测两种形态的细胞都表达和骨髓间充质干细胞一致的表面标记。体外培养增殖后像骨髓间充质干细胞一样形成漩涡样生长，在传代后保持各自的形态。

图1-3羊膜上皮细胞及羊膜间充质干细胞的免疫组化和免疫荧光结果(A)图为羊膜组织pan-CK免疫组化染色，(B)图为高羊膜上皮细胞爬片pan-CK免疫荧光染色，

-28-上皮细胞中的共表达（图1-3E）。图1-3羊膜上皮细胞及羊膜间充质干细胞的免疫组化和免疫荧光结果(A)图为羊膜组织pan-CK免疫组化染色，(B)图为高羊膜上皮细胞爬片pan-CK免疫荧光染色，(C)图为羊膜组织SSEA-4免疫荧光染色，(D)图为第一代....

图1-4A流式检测原代培养AEC不表达CD34、CD45，间充质标志表达CD73、CD105表达分别为99.27%、60.93%，组织相容性抗原HLA-ABC98.03%，不表达HLA-DR，CD326(EpCAM)阳性率为93.02%，干细胞多能性标记SSEA-4

-29-图1-4A流式检测原代培养AEC不表达CD34、CD45，间充质标志表达CD73、CD105表达分别为99.27%、60.93%，组织相容性抗原HLA-ABC98.03%，不表达HLA-DR，CD326(EpCAM)阳性率为93.02%....

本文编号：3918996