螺旋藻藻蓝蛋白体内外抗肝纤维化机理研究

发布时间：2024-03-27 19:52

　　肝脏疾病在我国有很高的发病率,肝纤维化是肝脏疾病加重的一个必经过程,防治肝纤维化是防止肝脏疾病加重的有效手段。肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)激活后,产生Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,Co-Ⅰ)等胞外基质是肝纤维化发生的关键,此外,肠道中的微生物及微生物相关分子模式(microbial-associated molecular patterns,MAMPs)也能通过肝肠循环到达肝脏,引 起肝脏炎症,促进肝纤维化的发展。藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)因为具有抗氧化、抗炎和增强免疫等特性,在食品领域有着广泛的应用,也具有潜在的药用价值。之前的很多研究表明PC具有保肝作用,但PC缓解肝纤维化的机理尚不明确,为了揭示PC缓解肝纤维化的具体机制,推动PC的精准应用,我们通过体内和体外实验,探究了 PC对肝纤维化的具体影响,以及肠道微生物在PC缓解肝纤维化过程中所起的作用。在体外实验中,我们用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化大鼠肝星状细胞HSC-T6,探究了不同浓度的PC对HSC-T6细胞增殖与凋亡的影响。结果显示1...

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 肝脏疾病的研究进展
        1.1.1 肝脏疾病的流行现状
        1.1.2 慢性肝病的发生及发展过程
        1.1.3 肝星状细胞与肝纤维化
        1.1.4 肝脏疾病与肠道微生物
        1.1.5 藻类活性物质与肝损伤
    1.2 藻蓝蛋白的生理活性及其在医药方面的应用
        1.2.1 藻蓝蛋白的结构
        1.2.2 藻蓝蛋白的安全性及生物利用度
        1.2.3 藻蓝蛋白的生理活性
        1.2.4 藻蓝蛋白的保肝效果
        1.2.5 藻蓝蛋白的调节肠道微生物效果
    1.3 本论文研究内容及意义
第2章 藻蓝蛋白对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖与凋亡的影响
    2.1 实验材料与仪器试剂
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 主要试剂与耗材
        2.1.3 仪器与设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞的培养方法
        2.2.2 藻蓝蛋白对细胞的渗透性观察
        2.2.3 细胞内荧光强度的观察
        2.2.4 细胞增殖的检测
        2.2.5 细胞总RNA的提取
        2.2.6 细胞内凋亡相关蛋白和纤维化标志物的检测
        2.2.7 统计学方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 藻蓝蛋白进入HSC-T6细胞的观察
        2.3.2 藻蓝蛋白对肝星状细胞增殖的影响
        2.3.3 藻蓝蛋白对肝星状细胞影响的形态学观察
        2.3.4 藻蓝蛋白对肝星状细胞纤维化标志物及凋亡标志物表达的影响
    2.4 小结
第3章 藻蓝蛋白缓解CCl₄致大鼠肝纤维化的研究
    3.1 实验材料与仪器试剂
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.0 实验动物伦理
        3.2.1 实验动物分组及干预
        3.2.2 样本采集
        3.2.3 HE和Masson染色
        3.2.4 大鼠肝脏总RNA的提取
        3.2.5 大鼠肝脏组织中纤维化标志物的检测
        3.2.6 肠道微生物的高通量测序
        3.2.7 统计学方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 大鼠体重变化
        3.3.2 大鼠肝脏病理分析
        3.3.3 PC对CCl₄诱导大鼠肝纤维化标志物的影响
        3.3.4 PC对大鼠肠道微生物的影响
    3.4 小结
第4章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 主要创新点
    4.3 展望
参考文献
附录
    附录1 常用缩略词表
    附录2 动物实验福利伦理审查申请表
致谢
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果



本文编号：3940409