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基于TLR4MyD88信号通路观察粪菌移植对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎干预作用机制

发布时间:2024-04-10 00:04
  目的:探讨粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)干预作用及其炎症相关的分子机制。方法:30只昆明小鼠采用DSS喂养建立结肠炎小鼠模型并随机分为模型组、FMT低剂量组和FMT高剂量组,另取10只作为对照组。FMT低剂量组、FMT高剂量组自造模后第1 d开始分别给予8 g/kg、15 g/kg粪菌剂量灌肠处理,灌肠体积0.2 m L。对照组和模型组给予等体积生理盐水灌肠处理。分别在实验第1、7、14及21 d称量小鼠体重。实验结束后处死小鼠,取出结直肠,观察各组小鼠结直肠形态变化并通过HE染色观察病变程度。ELISA检测小鼠结直肠组织匀浆液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin 6, IL-6)、白细胞介素-4(interleukin 4, IL-4)和白细胞介素-10(interleukin 10, IL-10)的表达变化...

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
前言
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 药品与主要试剂
    1.3 新鲜菌液制备
    1.4 动物模型建立及分组
    1.5 HE染色检测小鼠结肠组织形态
    1.6 ELISA检测小鼠结直肠组织匀浆液上清中炎症因子含量
    1.7 免疫组化检测小鼠结直肠组织NF-κB P65的表达
    1.8 RT-q PCR检测小鼠结直肠组织NF-κB P65 m RNA的表达
    1.9 Western blotting检测小鼠结直肠组织TLR4、My D88的蛋白表达
    1.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 FMT对小鼠活动、饮食及体重的影响
    2.2 FMT对小鼠结直肠组织形态的影响
    2.3 TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10在小鼠结肠组织匀浆液上清中的表达变化
    2.4 免疫组化和RT-q PCR检测NF-κB P65在小鼠结肠组织中的表达变化
    2.5 TLR4、My D88蛋白在小鼠结肠组织中的表达变化
3 讨论



本文编号:3949837

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