MicroRNAs下调LXRs的分子机制及其对肝细胞脂质生成的抑制作用研究

发布时间：2024-04-13 00:09

　　非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）是肝功能异常最常见的一种诱因，以甘油三酯（Triglyceride，TG）在肝细胞中的堆积为特征。脂代谢的稳态由一系列转录因子调控，包括核受体中的肝X受体（liver X receptors，LXRs）。LXRα （NR1H3）和LXRβ （NR1H2）是LXRs的两种亚型，它们通过激活脂代谢相关基因而启动肝脏脂质生成，这些靶基因包括固醇调节元件结合蛋白-1c (sterol-regulatory element binding protein1c，SREBP-1c)、脂肪酸合酶（fatty acid synthase，FAS）、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element-binding protein，ChREBP)和乙酰CoA羧化酶（acetyl-CoA carboxylase，ACC）。因此抑制LXRs的表达和活性就有可能保护肝脏免受脂肪堆积所造成的损伤。MicroRNAs (miRs)是非编码小RNA（20-22个核苷酸），能结合...

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图1-1M-MLV（Invitrogen）逆转录使用说明

图1-1M-MLV（Invitrogen）逆转录使用说明即进行下一步的PCR反应或冻存。PCR检测miR-1/206/613对LXRα表达的影响如下：（产物137bp）：'-gtgaaggtgacagcagycggtt-3''-gaagtggggtggct....

图1-22-ΔΔCt计算法示例

第三军医大学博士学位论文下游引物(10μM)ddH2O1μl17.7μleal-timePCR反应条件如下95℃×1cycle95℃60℃30sec30sec30sec｝×40cycles果分析采用Bio-RadIQ5软件对结果进行分析采用2-ΔΔCt....

图1-4SDS-PAGE浓缩胶配置方法

图1-4SDS-PAGE浓缩胶配置方法2).蛋白样品准备：各取40μg蛋白，加入5×蛋白上样Buffer，100℃或沸水浴加热5min。3).上样后，保持电压80V，待蛋白进入分离胶后，将电压调至120V，根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白....

图1-5生物信息学预测miR-1/206/613在LXRα3'-UTR区的结合位点

4).洗涤：加入Western洗涤液，在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤10-15min。弃洗涤液后，再加入洗涤液，洗涤10-15min。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。5).二抗孵育：参照二抗说明书，按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物....

本文编号：3952180