线粒体细胞凋亡途径在大鼠二甲基甲酰胺慢性中毒性肝损伤发病中的作用

发布时间：2024-04-16 20:29

　　目的:建立二甲基甲酰胺(DMF)慢性中毒性肝损伤大鼠模型,观察其病理特点和线粒体凋亡途径相关蛋白在DMF慢性中毒性肝损伤大鼠肝脏组织中的表达。探讨细胞凋亡机制在DMF发病中的作用。方法:⑴建立二甲基甲酰胺慢性中毒性肝损伤大鼠模型:将SD大鼠随机分为2组,每组各8只;DMF肝损伤组:腹腔注射40%DMF溶液1 ml/100g,每周1次;正常对照组:腹腔注射等体积的0.9%氯化钠注射液,每周1次;第8周给药后2天后抽血查肝功能(ALT、AST、ALB),并处死大鼠,进行病理及细胞凋亡相关蛋白检测;⑵肝功生化指标检测:采取全自动生化分析仪检测;⑶肝组织病理学检查:肝组织标本采取10%中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,HE及网状纤维染色,显微镜下病理分析;⑷细胞凋亡蛋白检测:采用免疫组织化学染色法检测Bax、Bcl-2、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9线粒体细胞凋亡途径相关蛋白,采用半定量积分法及ImageJ分析的方法对染色结果进行判断和统计分析。结果:⑴大鼠一般情况:与正常对照组相比DMF组大鼠体重减轻,第8周时与对照组相比体重有明显差异(450.2±12.6g vs 31...

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图2:大佩体里变化趋势图

实验结果1.大鼠一般状况DMF组大鼠给药后活动度明显减弱（图1A），进食和饮水量减少，持续约2天后缓慢恢复，随着给药次数的增加，上述症状逐渐减轻，精神、食欲及活动恢复的速度加快，持续时间缩短。后期大鼠毛色皮毛凌乱枯黄，无光泽，部分大鼠还出现腹部膨隆（图1B），进食量减少....

图4人正常对照组肝脏病理〔皿心oo)，盯小叶结构正常，盯细胞条素状排列，孩居中

3.2病理改变：对照组肝组织结构正常（图4A），DMF组大鼠肝组织炎症反应轻，小叶结构尚完整，肝细胞排列尚整齐，可见轻度肝细胞水肿，空泡变性，央静脉周边可见细胞嗜酸性病变（图4B）及凋亡小体(图4C)，毛细胆管轻度扩伴胆汁淤积，网纤染色见窦周纤维化（图4D）。

图7A、C），DMF组Cyt-c表达明显，在中央静脉周围肝细胞胞浆内可见大量橘黄色细颗粒沉积（图7B、D）

4.2Bcl-2蛋白表达情况：Bcl-2主要分布于细胞浆，在胞浆内呈棕色颗粒沉照组中未见Bcl-2表达（图6A、C），DMF组Bcl-2呈低表达，在中央静脉的细胞胞浆内表达（图6B、D）。

图8A、8C），DMF组Caspase-3高度表达，中央静脉周围的肝细胞浆内可见大量棕褐色颗粒沉积（图8B、8D）

4.4Caspase-3蛋白表达情况：Caspase-3蛋白主要分布于细胞浆中，呈棕褐色颗对照组中未见Caspase-3表达（图8A、8C），DMF组Caspase-3高度表达，静脉周围的肝细胞浆内可见大量棕褐色颗粒沉积（图8B、8D）。

本文编号：3956652