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肝细胞生长因子的激活对肝星状细胞凋亡及Rho表达的调控

发布时间:2024-05-19 11:11
  目的:研究肝细胞生长因子激活物(HGFA)激活肝细胞生长因子(HGF)后对肝星状细胞(HSCs)凋亡的影响及对Rho表达的调控,探讨HGF被激活后促进肝星状细胞凋亡的作用机制。 方法:将SD大鼠原代肝星状细胞(HSCs)分为5组,①空白对照组:HSCs单独培养;②实验对照组:a.外源性HGF(50ng/ml)干预HSCsb.外源性HGFA(70ng/ml)干预HSCs;③实验组:外源性HGF、HGFA同时干预HSCs;④HGF抑制剂组:HSCs与c-met受体阻滞剂(500ng/ml)共同作用6小时,更换培养液后加入外源性HGF和HGFA同时干预HSCs;⑤Rho通路抑制剂组:Rho通路抑制剂Y-27632(10ng/ml)与外源性HGF.HGFA共同干预HSCs.各组分别培养24h、48h和72h,于倒置相差显微镜下动态观察细胞形态学的变化;免疫组化法检测HSCs中α-平滑肌蛋白(α-SMA)的表达量;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Y-27632对HSCs的最佳干预浓度;流式细胞仪Annexin-V-FITC/PI双染法检测HSCs凋亡情况;共聚焦显微镜细胞爬片免疫荧光组织化学染色法...

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