α受体介导的雌二醇对大鼠结肠平滑肌细胞RhoA/ROCK通路的影响

发布时间：2024-06-06 04:20

　　目的:探讨17β-雌二醇(17β-estraial,E2)对大鼠结肠平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)RhoA/ROCK通路的影响。方法:体外分离培养Sprague-Dawley(SD)大鼠结肠SMCs。细胞免疫荧光双标法观察ROCK1、雌激素受体(ER)α与α肌动蛋白(α-SMA)共表达。不同浓度和不同时间E2刺激后,以反转录实时荧光定量qRT-PCR、Western blot检测RhoA、ROCK1表达。不同浓度ROCK抑制剂Y27632刺激后,Western blot检测E2对其下游蛋白表达情况。观察ER阻断剂ICI182780、牛血清白蛋白结合的E2(BSA-E2)、ERα激动剂PPT及ERβ激动剂DPN在E2影响RhoA、ROCK1表达的作用。构建ERα、ERβ的siRNA,观察E2刺激对转染后SMC中RhoA、ROCK1表达的影响。结果:细胞免疫荧光示结肠SMC上ROCK1与α-SMA共表达。50 nmol/L E2刺激24 h可显著抑制大鼠结肠SMC上RhoA、ROCK1表达(P <0.05)。Y27632可浓度依赖性抑制下游蛋白pMYPT1...

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【部分图文】：

siRNA转染SMC48h后予E2刺激，ERαsiRNA组RhoA、ROCK1蛋白及mRNA表达高于对照组（图6B),ERβsiRNA组与对照组差异无统计学意义。图2不同浓度E2刺激24h对大鼠结肠SMC中RhoA、ROCK1表达的影响

图1大鼠结肠SMC中ROCK1、ERα的表达3讨论

胃肠道动力障碍性疾病是临床常见病、多发病，大量临床研究显示女性发病率高于男性，提示女性激素在胃肠动力的抑制性调节中有重要作用[17-19]。多项研究证实雌激素可松弛膀胱、子宫、尿道等部位平滑肌[20-21]，但对结肠平滑肌收缩的直接作用鲜有研究。图4不同浓度ROCK抑制剂Y27....

图350nmol/LE2刺激不同时间对大鼠结肠SMC中RhoA、ROCK表达的影响图5鉴定E2抑制RhoA/ROCK通路的受体类型

本文编号：3990295