Perilipin 5缺失改善高脂高果糖诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病

发布时间：2025-01-14 02:28

　　背景和目的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)逐渐成为一种全球慢性肝脏疾病,涵盖了从单纯脂肪变性到非酒精性脂肪性肝炎(NASH),以及进展为肝纤维化和肝硬化,甚至肝细胞癌的一系列病理学变化。NAFLD是由于肝细胞内过度中性脂质沉积引起,主要形式是甘油三酯(TG),而TG以脂滴(LDs)的形式进行储存。LDs在脂肪酸(FA)的运输中起着核心作用。LDs表面的Perilipin 5(Plin 5)在肝脏等氧化组织中高表达,其作为中性脂质储存和水解的主要介质,控制着体内脂质平衡,当不平衡时就会导致脂肪肝的发生。有研究表明,过表达Plin 5能够促进肝细胞内脂质的储存,因此,Plin 5在NAFLD的发生发展中起着重要的作用。我们前期的体外研究显示,Plin 5可促进LDs形成,抑制肝星状细胞(HSCs)的激活,并诱导活化的HSCs凋亡,这为改善脂肪肝提供了新的见解。但体外和体内是两个完全不同的研究系统,本实验以Plin 5-/-小鼠为研究对象,评估Plin5在体内对高脂高果糖饮食诱导的NAFLD的影响。方法(1)购买的敲除小鼠是利用CRISPR/Cas9技术进行的Plin5基因敲除。选择后代雌性P...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１?Ｐｌｉｎ?５敲除小鼠鉴定策略示意图??

?材料与方法???２．２．２?ＰＣＲ?扩增??２．２．２．１小鼠基因型鉴定引物信息??小鼠基因型鉴定设计思路如图２．１所示。??ＦＩ?ＲＩ??－？①ＫＯ?命????—＾―?ＫＯ?ｆｒａｇｍｅｎｔ????Ｆ２?Ｒ２??－？②?ＷＴ?？??—？?Ｐｒｉｍｅｒ?①②?ＰＣ’Ｒ?Ｒｅａｃ....

图３．１小鼠基因型鉴定??２０??

?＾???结果??１?Ｐｌｉｎ?５基因敲除小鼠鉴定??购买的Ｆ１代小鼠进行饲养繁育，得到的后代进行基因型鉴定。图３．１Ａ为??部分小鼠基因型鉴定结果：１号、２号和５号小鼠用ＷＴ引物在４６２ｂｐ处有条带，??用ＫＯ引物在７３７ｂｐ处有条带，则为杂合子；６号小鼠用ＷＴ引物无条带，用?....

图３．２小鼠腹腔注射葡萄糖耐量试验结果??注：Ａ．小鼠腹腔注射葡萄糖耐量试验（ＩＰＧＴＴ）结果，分别检测在Ｏｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、??

?＾???（图３．２Ｂ）。在小鼠禁食过夜后，首先进行空腹血糖检测，结果显示：与ＮＤ组??相比，ＨＦＤ组有增高的趋势，且ＨＦＤ－Ｐｌｉｎ５＿Ａ组小鼠血糖值更高，但均无统计学??差异（Ｐ＞０．０５）（图３．２Ｃ）。在给予葡萄糖刺激１２０ｍｉｎ时，ＮＤ两组小鼠血糖水??平无统计学差异（....

图３．３小鼠肝脏肉眼观??－－－－Ａ－－Ａ

?＾???４小鼠肝脏肉眼观??ＮＤ－Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ组和ＮＤ－Ｐｌｉｎ５ｖ？组小鼠肝脏表面光滑、色泽红润、肝缘锐利，??未见脂质沉积，且两组未见明显差异（图３．３ａ和图３．３ｃ）。与ＮＤ－Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ组相??比，ＨＦＤ－Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ组小鼠肝脏体积明显增大，表面布满黄色斑点....

本文编号：4026268