抑制COX-2对非酒精性脂肪肝细胞凋亡与衰老的影响

发布时间：2017-07-17 12:01

  本文关键词：抑制COX-2对非酒精性脂肪肝细胞凋亡与衰老的影响

  更多相关文章： 非酒精性脂肪性肝病 COX-2 尼美舒利 细胞凋亡 细胞衰老

【摘要】：目的:观察COX-2抑制剂尼美舒利对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠细胞凋亡与衰老的影响。方法:36只SD大鼠按体重随机均分为对照组、NAFLD模型组、尼美舒利组。所有大鼠适应性喂养1W后,除对照组予普通饮食喂养外,其余2组皆饲喂高脂饲料进行造模,共12W。尼美舒利组大鼠于造模第1W开始灌胃给予尼美舒利,剂量为6mg/kg/d。11W末时随机从对照组和NAFLD模型组各抽取2只大鼠,留取肝组织行Masson胶原染色病理检查鉴定成模。余下的各组大鼠皆按原方法饲养至12W末。第12W末处死动物,处死前隔夜禁食并称重。每只大鼠经下腔静脉取血,离心分离血清,全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(Alanine Transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC);取各组肝组织行油红O染色、苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)和Masson胶原染色观察并分析大鼠肝脏组织病理学的改变;实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,q PCR)检测大鼠肝脏COX-2和α-SMA m RNA的表达情况;TUNEL(Td T-mediated d UTP nick end labeling)染色法检测大鼠肝脏细胞凋亡;衰老相关β-半乳糖苷酶染色法(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)检测大鼠肝脏细胞衰老。结果:1.11W末时Masson胶原染色结果显示:对照组大鼠肝细胞呈红色,肝小叶结构清晰;NAFLD模型组大鼠肝组织血管壁及汇管区可见纤维,细胞间质未见明显胶原沉积,肝细胞脂肪变≥5%。2.造模结束时(12W末)与对照组相比,NAFLD模型组大鼠的血清ALT、TC水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与NAFLD模型组相比,尼美舒利组大鼠血清AST、TC、TG水平均降低,差异有统计学意义(P0.05)。3.据油红O染色所示,对照组、NAFLD模型组、尼美舒利组大鼠肝组织脂变面积分别为(0.00±0.00)%、(41.32±12.61)%、(23.40±11.43)%。尼美舒利组大鼠肝组织脂变面积明显低于NAFLD模型组(P0.01)。4.q PCR检测结果:尼美舒利组大鼠肝脏组织中α-SMA表达水平较对照组和NAFLD模型组均降低,差异有统计学意义(P0.05)。NAFLD模型组大鼠肝脏组织中COX-2表达水平较正常组表达增高(P0.05);尼美舒利组COX-2表达水平较NAFLD模型组显著降低(P0.01)。5.TUNNEL染色并计算细胞凋亡指数结果:对照组、NAFLD模型组、尼美舒利组大鼠肝组织细胞凋亡指数分别为(1.80±0.94)%、(6.47±2.53)%、(3.00±1.20)%。NAFLD模型组较对照组相比细胞凋亡指数升高,差异具有显著性(P0.01);尼美舒利组较NAFLD模型组相比减少,差异有统计学意义(P0.05);尼美舒利组与对照组相比,细胞凋亡指数差异无统计学意义(P0.05)。6.SA-β-Gal染色并计算细胞衰老指数结果:对照组、NAFLD模型、尼美舒利组大鼠肝组织细胞衰老指数分别为(14.00±8.41)%、(0.00±0.00)%、(32.20±19.19)%。NAFLD模型组较对照组相比细胞衰老指数减少,差异有显著性(P0.01);尼美舒利组较模型组细胞衰老指数增加,差异有显著性(P0.01);尼美舒利组与对照组相比,细胞衰老指数差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.尼美舒利对高脂诱导的大鼠NAFLD的发生发展有控制作用,在改善其血脂代谢、肝功能及肝脏病理学改变方面效果明显。2.尼美舒利对实验性NAFLD大鼠的保护作用可能与其下调COX-2基因表达,降低α-SMA,从而抑制NAFLD肝脏中有护肝作用的肝细胞凋亡、促进肝脏中损肝作用的细胞衰老有关。
【关键词】：非酒精性脂肪性肝病 COX-2 尼美舒利 细胞凋亡 细胞衰老
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575.2
【目录】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 主要英文缩略语12-14
• 第1章 引言14-18
• 第2章 实验材料与方法18-28
• 2.1 实验材料18-20
• 2.2 实验方法20-28
• 第3章 实验结果28-38
• 3.1 各组大鼠一般情况及体重变化28-29
• 3.2 各组大鼠血清学指标变化29-30
• 3.3 各组大鼠肝脏组织病理学改变及分析30-34
• 3.4 各组大鼠肝脏组织COX-2、αSMAmRNA的表达34-35
• 3.5 各组大鼠肝脏组织细胞凋亡的情况35-36
• 3.6 各组大鼠肝脏组织细胞衰老的情况36-38
• 第4章 讨论38-42
• 4.1 尼美舒利对NAFLD大鼠细胞凋亡的影响38-39
• 4.2 尼美舒利对NAFLD大鼠细胞衰老的影响39-42
• 第5章 结论42-44
• 参考文献44-48
• 综述48-60
• REFERENCE55-60
• 硕士期间撰写论文及获奖情况60-62
• 致谢62

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王瑞雪;王树华;朱丽艳;;尼美舒利β-环糊精包合物的制备[J];中国煤炭工业医学杂志;2008年12期

2 张丽霞;;尼美舒利治疗儿科高热的疗效和安全性[J];中国医药导刊;2008年07期

3 陈新梅,高晓黎,白丽;用药效学试验筛选尼美舒利新剂型[J];中国药学杂志;2003年11期

4 高晓黎,陈新梅;紫外分光光度法测定尼美舒利栓的含量[J];中国药师;2003年05期

5 胡云飞;王玲珑;杨嗣星;刘修垣;钱辉军;张孝斌;;尼美舒利治疗男性慢性盆腔疼痛综合征临床试验[J];药物流行病学杂志;2005年06期

6 王井和;胡国华;;小儿清热宁与尼美舒利联合治疗小儿急性上呼吸道感染[J];医药导报;2006年12期

7 周妍;陈洋;;尼美舒利对呼吸科发热患者退热疗效观察[J];实用药物与临床;2006年06期

8 陈新梅;;紫外分光光度法测定尼美舒利栓中尼美舒利含量(英文)[J];中国现代应用药学;2007年02期

9 朱锦秀;石庆平;邢蓉;刘雁;许善初;;尼美舒利口服制剂国内文献不良反应分析[J];中国医药导报;2008年36期

10 王长远;秦俭;孙长怡;王晶;;尼美舒利导致多脏器功能不全综合征死亡[J];药物不良反应杂志;2008年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 蒋肖男;;12岁以下儿童禁止使用尼美舒利[A];2011全国中医药科普高层论坛文集[C];2011年

2 韩丹;代菲;储文功;;247例尼美舒利所致药物不良反应报告的分析[A];2013年中国药学会药事管理专业委员会年会暨“医药安全与科学发展”学术论坛论文集（下册）[C];2013年

3 黄海强;;40例尼美舒利所致不良反应的文献分析[A];海南省药学会2011年学术年会论文集[C];2011年

4 陈小平;永星;李小刚;;尼美舒利对大鼠脑出血后脑水肿基质金属蛋白酶2的影响[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

5 田家军;徐伟;于亮;逯素梅;;尼美舒利抑制喉癌转移机制探讨[A];2010全国耳鼻咽喉头颈外科中青年学术会议论文汇编[C];2010年

6 赵优曼;赵会英;马驰;;热熔挤出法制备尼美舒利固体分散体[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

7 何用忠;杨林;;尼美舒利凝胶剂的制备与质量控制[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年

8 张丽媛;章竹君;;毛细管电泳与微超滤技术联用检测人体血清中的尼美舒利[A];第八届全国发光分析暨动力学分析学术研讨会论文集[C];2005年

9 宫爱霞;关凤林;于春红;刘敏;吕申;;姜黄素、尼美舒利联合应用对胰腺癌细胞增殖的抑制作用[A];第九届全国中西医结合普通外科学术交流大会暨胆道胰腺疾病新进展学习班论文汇编[C];2005年

10 杨美燕;郭继芬;范云周;白雪茜;靳海明;贺绍珑;高春生;;尼美舒利口服双相释药系统体内外评价研究[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 本报记者 唐闻佳;尼美舒利：毒和效哪个大？[N];文汇报;2011年

2 记者 柳志梅;20家尼美舒利生产企业在津发布联合声明[N];中国医药报;2011年

3 Piyush Gupta H.P.S. Sachdev(作者系印度儿科医师学会主席) 洪丽萍 陈云飞;儿童口服尼美舒利的安全性评价[N];医药经济报;2006年

4 叶子　海啸;尼美舒利：国内企业主导市场[N];中国医药报;2009年

5 康文;尼美舒利肝安全有效 疗效收益大于风险[N];医药经济报;2009年

6 商报记者 肖玮;“尼美舒利”风波调查[N];北京商报;2011年

7 本报记者 陈雅琼;药品下架拖累康芝药业昨日跌幅第一 多家药店尼美舒利未下架 董秘称有人想毁掉这个产业[N];证券日报;2011年

8 本报记者 刘凌林;“尼美舒利事件”风波再起[N];中国企业报;2011年

9 记者 钟可芬　陆晋源;尼美舒利说明书或修改 康芝药业主业面临危机[N];第一财经日报;2011年

10 记者 龚雯;康芝药业：何时走出“尼美舒利”阴影[N];经济参考报;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 周璇;抑制COX-2对非酒精性脂肪肝细胞凋亡与衰老的影响[D];南华大学;2015年

2 陈君;兽用尼美舒利注射的制备与初步评价[D];西南大学;2011年

3 陈铁;尼美舒利对牙周炎作用的实验研究及临床疗效评价[D];暨南大学;2005年

4 彭芳;尼美舒利对大鼠HSC-T6细胞Rassf1基因表达的影响[D];南华大学;2013年

5 范云周;尼美舒利口服双相释药系统研究[D];河南大学;2011年

6 田家军;尼美舒利抑制下咽癌细胞生长和转移的实验研究[D];山东大学;2011年

7 袁园;尼美舒利温度敏感凝胶的制备与评价[D];河北医科大学;2010年

8 宋哲;新型超分子材料磺丁基醚-β-环糊精与尼美舒利包合物研究及软膏剂制备[D];重庆大学;2013年

9 吴慧哲;联用尼美舒利对5-氟尿嘧啶在大鼠体内药代动力学的影响[D];中国医科大学;2006年

10 郭锐芳;生长抑素受体亚型特异性激动剂、尼美舒利对人肝癌细胞生长的影响[D];宁夏医科大学;2010年

，

本文编号：553459