脱氧胆酸通过KLF4上调CDX2的表达促进Barrett食管形成

发布时间：2017-08-02 10:03

  本文关键词：脱氧胆酸通过KLF4上调CDX2的表达促进Barrett食管形成

  更多相关文章： Barrett食管 Het-A细胞 脱氧胆酸 Krüppel样锌指转录因子 同源异型框转录因子

【摘要】：目的探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2,CDX2)的作用。方法采用免疫组化S-P法检测49例人正常食管组织和22例BE组织中KLF4、CDX2的表达;体外培养Het-1A细胞,依据DCA处理时间分为0 h组(未经DCA处理)、4 h组、8 h组、12 h组并进行DCA处理。分别设置空白对照组、阴性siRNA对照组、阴性siRNA+DCA处理12 h组、KLF4-siRNA干扰组、KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组,进行相应处理。设置空白对照组、阴性病毒对照组、阴性病毒+DCA处理12 h组、KLF4过表达病毒组,进行相应处理。待上述各实验组处理结束后,运用Real-time PCR、Western blot检测各组KLF4、CDX2、MUC2mRNA及蛋白的表达。结果免疫组化检测发现:在22例BE组织中,KLF4阳性表达15例,阳性率68.18%,阳性染色主要集中在细胞核;CDX2阳性表达16例,阳性率72.73%,阳性染色也主要集中在细胞核。与人正常食管鳞状上皮组织比较,BE组织中KLF4、CDX2表达均增高(χ2=18.642,P0.05;χ2=23.678,P0.05)。Real-time PCR及Western blot检测结果显示:随DCA处理时间的增加,Het-1A细胞KLF4、CDX2、MUC2的表达逐渐升高(P0.05);KLF4-siRNA干扰组及KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均下调,且不再随DCA处理的刺激而升高(P0.05);此外,阴性病毒+DCA处理12 h组及KLF4过表达病毒组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均上调,且KLF4过表达病毒组3个基因蛋白表达上调更为显著(P0.05)。结论 DCA通过KLF4上调CDX2,间接引起BE标志性分子MUC2的表达上调,从而促进正常食管上皮向BE转化。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院全军消化病研究所;
【关键词】： Barrett食管 Het-A细胞 脱氧胆酸 Krüppel样锌指转录因子 同源异型框转录因子
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81170356)~~
【分类号】：R571
【正文快照】： 第三军医大学西南医院全军消化病研究所)Supported by the General Program of National Natural Science Foundation of China(81170356).Corresponding author:Fang Dianchun,E-mail:fangdianchun@hotmail.comBarrett食管(Barrett’s esophagus,BE)是指食管下段鳞状上皮被柱

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