大黄素治疗重症急性胰腺炎作用机制的研究
发布时间：2017-08-13 15:09
本文关键词：大黄素治疗重症急性胰腺炎作用机制的研究
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【摘要】：目的观察大黄素对重症急性胰腺炎大鼠病情严重程度及各器官病理损害的影响证实其有治疗重症急性胰腺炎的作用;通过分析大黄素对重症急性胰腺炎大鼠细胞因子水平和Treg比例及功能的影响,阐释其治疗重症急性胰腺炎的机制。方法清洁级Wistar大鼠60只,随机分为3组(n=20):(1)假手术对照(Sham)组;(2)重症急性胰腺炎(SAP)模型组;(3)大黄素(Emodin)治疗组。采用胆胰管逆行注入5%牛磺胆酸钠的方法制备大鼠SAP模型,大黄素治疗组在制作SAP模型后经腹腔缓慢注射大黄素2.5mg/Kg体重,余两组注射等量生理盐水。术后24小时处死大鼠,运用全自动生化分析仪检测大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶、AST、ALT水平,分光光度计法检测肺组织匀浆上清中MPO活力,计算肺湿干重比值。采用HE染色方法检测胰腺、肺、肝器官组织病理损害程度。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1水平。采用直接免疫荧光法对CD4+和Foxp3+T淋巴细胞进行标记,流式细胞仪检测各组大鼠Treg淋巴细胞比例及Treg/CD4+比值;实时荧光定量PCR方法检测Foxp3 m RNA、CTLA-4 m RNA的表达。结果1、与假手术对照组比较,SAP模型组血清脂肪酶、血清淀粉酶、AST、ALT、肺MPO活力和肺湿干重比值明显增高(P0.05),胰腺、肺、肝病理损害明显,组织学评分升高(P0.05);大黄素治疗组以上血清指标及MPO活力均下降(P0.05),同时各器官病理损害减轻,组织学评分下降(P0.05)。2、SAP模型组血清中TNF-α、IL-6、MCP-1水平高于假手术组(P0.05),而IL-10水平低于假手术组(P0.05);大黄素治疗组血清中TNF-α、IL-6、MCP-1水平较SAP模型组显著下降,而IL-10水平升高(P0.05)。3、SAP模型组Treg比例及Treg/CD4+T细胞比值都升高(P0.05),同时Foxp3、CTLA-4 m RNA表达都增强(P0.05);大黄素治疗组Treg比例及Treg/CD4+T淋巴细胞比值较SAP模型组均降低(P0.05),Foxp3、CTLA-4 m RNA表达都减弱(P0.05)。结论1、应用5%牛磺胆酸钠逆行性胰胆管注射制备SAP全身器官损伤模型,病理学检测证实:胰腺及肺、肝器官出现不同程度水肿、出血、坏死及炎性细胞浸润,模型相对稳定,可重复性好。2、大黄素能够减轻重症急性胰腺炎大鼠病情严重程度及各器官病理损害。3、大黄素能够调节重症急性胰腺炎大鼠外周血促炎-抗炎的平衡关系,减轻全身炎症反应,同时能够降低Treg数量比例及功能活性,改善机体免疫抑制,从而达到治疗重症急性胰腺炎的效果。
【关键词】：重症急性胰腺炎 Treg 免疫抑制 Foxp3 大黄素 细胞因子
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R576
【目录】：
- 中文摘要4-6
- Abstract6-11
- 缩略语/符号说明11-13
- 前言13-15
- 研究现状、成果13-14
- 研究目的、方法14-15
- 一、大黄素治疗重症急性胰腺炎的效果15-32
- 1.1 对象和方法15-21
- 1.1.1 实验动物15
- 1.1.2 实验试剂15-16
- 1.1.3 实验仪器16
- 1.1.4 动物分组和模型制备16-17
- 1.1.5 标本采集与检测指标17-21
- 1.1.6 统计学方法21
- 1.2 结果21-28
- 1.2.1 各组大鼠术后一般情况及 24h死亡率21-22
- 1.2.2 各组血清淀粉酶、血清脂肪酶水平比较22-23
- 1.2.3 各组大鼠胰腺组织病理变化23-24
- 1.2.4 各组大鼠肺湿干重比24
- 1.2.5 各组大鼠肺MPO24-25
- 1.2.6 各组大鼠肺组织病理变化25-26
- 1.2.7 各组大鼠谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶(AST)比较26-27
- 1.2.8 各组大鼠肝组织病理变化27-28
- 1.3 讨论28-31
- 1.3.1 SAP的各器官功能损害28-30
- 1.3.2 大黄素对SAP的治疗效果30-31
- 1.4 小结31-32
- 二、大黄素对重症急性胰腺炎大鼠细胞因子的影响32-40
- 2.1 对象和方法32-35
- 2.1.1 实验动物32
- 2.1.2 实验试剂32
- 2.1.3 实验仪器32-33
- 2.1.4 动物分组和模型制备33
- 2.1.5 检测指标33-35
- 2.1.6 统计学方法35
- 2.2 结果35-36
- 2.2.1 各组大鼠细胞因子水平35-36
- 2.3 讨论36-38
- 2.3.1 SAP细胞因子与免疫失衡36-38
- 2.3.2 大黄素对SAP细胞因子水平的影响38
- 2.4 小结38-40
- 三、大黄素对重症急性胰腺炎Treg的影响40-49
- 3.1 对象和方法40-43
- 3.1.1 实验动物40
- 3.1.2 实验试剂40-41
- 3.1.3 实验仪器41
- 3.1.4 动物分组和模型制备41
- 3.1.5 检测指标41-43
- 3.1.6 统计学方法43
- 3.2 结果43-45
- 3.2.1 各组大鼠脾淋巴细胞中Treg比例43-45
- 3.2.2 各组大鼠Foxp3 mRNA,CTLA-4 mRNA表达45
- 3.3 讨论45-48
- 3.3.1 SAP细胞免疫功能改变45-46
- 3.3.2 Treg在SAP中的作用46-47
- 3.3.3 大黄素对SAP中Treg的影响47-48
- 3.4 小结48-49
- 全文结论49-50
- 论文创新点50-51
- 参考文献51-59
- 发表论文和参加科研情况说明59-60
- 附录60-61
- 综述 CD4~+CD25~+ Treg细胞在脓毒症中作用研究进展61-69
- 综述参考文献65-69
- 致谢69
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 梁志海;王s，
本文编号：667912
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/667912.html
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